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选1-2-1微生物的实验室培养资料
酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是浓度过高,菌体表面蛋白质变性过快从而凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌能力减弱 特 别 提 醒 例2 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( ) A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针 C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅 解析:高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备,通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环、接种针。 答案:C 2.下列操作与消毒和灭菌无关的是( ) A.接种前用火焰灼烧接种环 B.接种前用酒精擦拭双手 C.将平板倒置,放入培养箱中培养 D.接种在酒精灯的火焰旁完成 解析:要建立“有菌观念”。接种用具、器皿、空气中都充满了微生物,都有污染的可能,必须严格地消毒、灭菌。A、B、D都是实验操作过程中常用的消毒和灭菌方法。将平板倒置,放入培养箱中培养与消毒、灭菌无关。 答案:C 三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及纯化大肠杆菌 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程 2.纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项 (1)平板划线法中几次灼烧接种环的目的: 杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者 接种 结束后 杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来自于上次划线末端,使每次划线菌种数目减少,达到分离菌株的目的 每次 划线前 杀死接种环上原有微生物 取菌种前 目的 灼烧时期 (2)稀释涂布平板法操作比较复杂,且各个细节均需保证无菌操作,应特别注意: ①酒精灯与培养皿的距离要适宜。 ②吸管头不要接触其他任何物体。 ③吸管要在酒精灯火焰周围使用。 ④涂布器末端浸在盛有70%酒精的烧杯中,取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃,注意防火。 ①在稀释涂布平板操作中,每个步骤都要注意无菌操作,以防培养基被污染,影响实验效果。 ②每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板,作为实验重复,求平均值,若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者,应舍弃该实验数据,不进行统计、计算。 ③平板冷凝后,皿盖上会凝结成水珠。凝固后的培养基表面的温度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。 特 别 提 醒 例3 关于平板划线操作的叙述正确的是( ) A.使用已灭菌的接种环、培养皿,在操作过程中不需要再灭菌 B.打开含菌种的试管,需通过火焰灭菌,取出菌种后,需马上塞上棉塞 C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可 D.最后将平板倒置,放在培养箱中 解析:使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程仍要灭菌;打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后含菌种的试管需要通过火焰灭菌后再塞好棉塞;将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线后盖上皿盖;最后应将平板倒置,放入培养箱中培养。 答案:D * 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 微生物包括哪五类: 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 体积微小、结构简单,大多是单细胞。 还有单细胞藻类 科学家在南极数百英尺的冰层下面,在没有光和氧气的环境中,发现了一种微生物。据推测,它们已经生存了150万年之久。基因检测显示,它们类似今天海洋环境中的微生物。科学家认为,这些微生物曾经生活在海洋里,150万~200万年前海洋被冰川截断形成像大池塘的水面,后来又被冰川覆盖。从此,这些微生物与世隔绝了。 请思考: 1.微生物是如何获得能量维持生存的? 2.它们还需要哪些营养物质? 1.概念 人们按照微生物对__________的不同需求,配制出供其__________的营养基质。 2.种类 按照培养基的__________划分为______培养基和______培养基。 一、培养基 营养物质 生长繁殖 物理状态 液体 固体 3.营养要素 各种培养基一般都含有水、________、________、__________,此外还要满足微生物生长对________、____________以及______的要求。 碳源 氮源 无机盐 pH 特殊营养物质 氧气 二、无菌技术 1.获得纯净培养物的关键是防止__________的入侵,具体操作如下: (1)对实验操作的______、操作者的衣着和手进行______和______。 (2)将用于微生物培养的______、__________和________等
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