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黄颡鱼全雄鱼育种方案资料
全雄黄颡鱼育种方案 2014年11月 背景 黄颡鱼是我国淡水水体中分布较广的底层经济鱼类,在中高档名贵品种中具有较大的开发价值 黄颡鱼雄鱼比雌鱼生长快。 ‥根据调查:相同养殖条件下,第一年雄性黄颡鱼比同胞雌鱼的生长速度快30%左右。第二年,其雄鱼生长至150-200克,而雌鱼仅50-75克,雌雄生长速度相差接近3倍。 ?能否培育出全雄黄颡鱼 培育方案 技术方案(一) (1)人工催产 雌鱼: 催产剂 HCG+LRH-A2 HCG800~1000IU+ LRH-A25~8μg/尾 24~28h后挤 出成熟卵子 26℃的水浴 冰浴上低 温保存备用 催产剂 HCG +LRH-A2 剂量减半 解剖取出精巢 剪刀剪碎 精子保存液 洗滤出精子 冰浴保存 雄鱼: 培育方案 人工授精 ‥取卵子与精子混合进行干法人工受精 受精卵子置于27℃生化培养箱中恒温孵育成雄鱼和雌 鱼苗并全部出膜 (2)性逆转 将普通雄性黄颡鱼性逆转成生理雌鱼: 100~200μg/L 17-α-乙炔基雌二醇溶液浸泡的卤虫幼体 投喂已开口摄食的人工繁殖黄颡鱼苗 ,连续投喂40天, 经性激素处理后成活的鱼苗中约50%的XY♂雄鱼性逆转 成为XY♀生理雌鱼,而XX♀雌鱼不变,将性逆转的幼鱼 转移至水泥池中用甲鱼饲料养至性成熟 培育方案 (3)测交、筛选、鉴定 将XY♀生理雌鱼与XY♂普通雄鱼测交并进行性 比分析,筛选XY♀生理雌鱼即: XY♀×XY♂→25%XX♀+50%XY♂+25%YY♂,雌雄比 1:3则可确认受试鱼为 XY♀生理雌鱼 XX♀×XY♂→50%XX♀+50%XY♂,雌雄比1:1则可确认 受试鱼为XY♂普通雄鱼 (4) YY♂ 超雄鱼筛选 筛选出的XY♀生理雌鱼与XY♂普通雄鱼测交, 所得后代雄鱼( XY♂ 与YY♂ )再与XX♀普通雌 鱼进行测交,筛选YY♂ 超雄鱼即: XY♀×XY♂→25%XX♀+50%XY♂+25%YY♂; 培育方案 XY♂×XX♀→ 50%XY♂+50% XX♀;性别比为1:1, 则可确认受试鱼为 XY ♂雄鱼 YY♂×XX♀→ 100%XY♂;全为雄鱼,则可确认受试 鱼为 YY♂超雄鱼 (5)建立超雄鱼繁殖系: 将遗传表型为YY ♂超雄鱼再经雌激素投喂性 逆转为生理表型为YY ♀的雌鱼,再与遗传表型为 YY ♂的超雄鱼雄鱼杂交批量培育YY ♂超雄鱼 (6)建立全雄鱼生产系: 全雄鱼制种以XX♀普通雌鱼与YY ♂超雄鱼交 配,则可规模化生产XY♂全雄鱼颡鱼,即: XX♀×YY♂→100%XY♂全雄鱼 黄颡鱼全雄育种 技术方案(二) ‥技术路线 亲鱼培养 人工催产 激素性逆转 雌核发育 YY超雄黄颡鱼 全雄鱼 Step1、Step2及Step3与技术方案(一)相同 Step4:黄颡鱼雌核发育 ‥ (1)精子灭活 ∴ 采用物理(γ射线、x射线或紫外线等处理使精子遗传物质失活)、化学(化学物质如:甲苯胺蓝、乙烯尿素和二甲基硫酸等消除精子染色体遗传活性)、显微手术法(直接去除雄性原核) 培育方案 ‥ (2)雌核二倍体的获得 ∴方法:1、阻止第一次有丝分裂或第二极体排除; 2、利用温度、压力或化学方法,如冷、热休 克、流体静水压、细胞松弛素B、聚乙二醇处 理等 ∷步骤:1、首先进行人工授精 2、在精核与卵核尚未融合前用极细吸管将精核 去掉 3、在细胞松弛素B的作用下使雌核加倍,形成二 倍体 4、二倍体细胞在体外培养到囊胚期后移植养母 子宫内,使胚胎继续发育,直至出生。 培育方案 Step5建立全雄鱼生产系: ‥通过雌核发育获得YY超雄鱼,再通过性逆转获得YY生理雌鱼,以XX♀普通雌鱼与YY ♂超雄鱼交配,则可规模化生产XY♂全雄鱼颡鱼即: XX♀×YY♂→100%XY♂全雄鱼 主要技术路线图: 谢谢!
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