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课题3分解纤维素的微生物的分离学案 考点要求 1．能简述纤维素酶的种类及作用， 2．能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。 3．能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。 双基过关 一、纤维素与纤维素酶 1．纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。 2．纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。 3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。 二、纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法： 染色法。 2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的透明圈，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。 三、试验设计 土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案 ： 分解纤维素的微生物的分离的试验流程 、 、 、 、 1．土壤取样：采集土样时，应选择富含 的环境。 2．选择培养： 阅读资料二“选择培养基”，回答以下三个问题： 〖思考1〗纤维素分解菌选择培养基属于 培养基，原因是什么？。 〖思考2〗培养基选择作用机制是什么？ 〖思考3〗若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？ 1 目的：增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。 2 制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。 3 选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。 （4）梯度稀释： 依次将培养液稀释101～107倍。思考是如何操作的？ 5 ．将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 制备培养基：参照课本旁栏中的比例。 倒平板操作。 涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0．1 mL涂布在平板培养基上，30℃倒置培养。 6 ．刚果红染色法：挑选产生 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 〖思考4〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？ 3刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即 。 阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点 是 、 。 阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点： 〖思考5〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 四：结果分析与评价 1为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行 实验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。 2纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进行定量测定。 ◇◇ 典例精析 【例1】纤维素酶可以将下列哪种物质分解………… A．牛肉片 B．鱼片 C．滤纸条 D．塑料条 【例2】在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是…………… A．分解尿素的细菌 B．硝化细菌 C．分解纤维素的细菌 D．乳酸菌 【例3】本实验关于选择培养目的叙述正确的是… A．可以增加纤维素分解菌的浓度 B．可以减少纤维素分解菌的浓度 C．所用培养基是固体培养基 D．所用培养基是平板培养基 ◇◇基础自测 一、选择题 1．下列材料中纤维素含量最高的是 A．杨树 B．小麦 C．玉米 D．棉花 2．纤维素酶能够分解（ ） A．纤维素的微生物 B．淀粉的微生物 C．纤维素 D．淀粉 3．刚果红能与哪项物质形成红色复合物 A．纤维二糖 B．纤维素 C．葡萄糖 D．麦芽糖 4．寻找纤维素分解菌应到…（ ） A．湿润的环境中 B．富含纤维素的环境中 C．富含无机盐的环境中 D．池塘中 5．纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有… A．NaNO。 B．KCl C．酵母膏 D．纤维素粉 6．下列哪种生物能产生纤维素酶 A纤维素分解菌 B．牛 c．羊 D．兔 7．选择培养时应将锥形瓶固定在 A．桌子上 B．温箱里 C．窗台上 D．摇床 8．选择培养的结果：培养液变…（ ） A．清澈 B．浑浊 C．红色 D．产生透明圈 9．刚果红染色时，加入刚果红可在…… ①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤培养基上长出菌落时 A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤ 10．两种刚果红染色法的结果是（ ） A．均会出现透明圈 B均不会出现透明圈 C方法一出现方法二不出现 D方法一不出现方法二出现 11．下面是弗来明对青霉素的早期研究过程： 发现问题：在培养细菌的器具中发现一种青霉菌，在这种青霉菌的周围有没有其它细菌生存?为什么会产生这种现象 提出假设： 设计实验：在液体中培养青霉菌后，考察这种液体对细菌增殖的影响。 实验