两种多酚类物质对Aβ42聚集与毒性的影响及Aβ116毒性与炎症反应的研究.pdf

在学期间科研成绩…………………………………………………………一61 致谢…………………………………………………………………………62 个人简介……………………………………………………………………·63 为特征的中枢神经系统变性疾病，病情呈进行性加重，在几年内丧失独立生活能 力，10年左右常因并发感染而死亡。由于老年人群的增长，AD已成为现代社会 的常见病，引起了研究者们的关注。AD的典型病理特征是神经细胞内出现神经 元纤维缠结，神经细胞外存在神经炎斑或称老年斑，老年斑的中心为B淀粉样蛋 突触丢失，损伤胆碱能神经元，影响细胞Ca2+的平衡，AB诱导产生的活性氧自 由基可破坏细胞膜，促使脂质过氧化和膜蛋白损伤。生理情况下At)是可溶的， 低浓度不表现神经毒性，当可溶性的AB达到了临界浓度，就会发生构象的变化， 从单体聚集形成具有稳定构象的寡聚体或纤维。Ap在AD病人脑中有几种不同 形式，包括可溶性的单体、寡聚体和不可溶的纤维。其中，寡聚体是毒性最大的。 AD具有很强的自我聚集能力，寻找一些分子阻止或干扰Ap聚集或减轻其毒 性已成为AD治疗的理想靶标。研究表明，适当的饮用红葡萄酒可以减轻AD病 人的认知功能障碍及淀粉样沉积的病理变化。红葡萄酒中含有大量的多酚类物 质，这些多酚类物质可以与一些肽或蛋白结合，起到了预防和治疗不同疾病的作 用。多酚类物质具有潜在的抗淀粉样蛋白活性，从葡萄籽中提取出来的多酚类物 质可以减少Ap产生，抑制Ap聚集和毒性，姜黄素也能有效减少脑内AD毒性和 小胶质细胞的激活。本研究以毒性较大的A[342为研究对象，探讨了两种多酚类 acid，EA)对其聚集和细胞毒 物质白藜芦醇(Resveratrol，Res)和鞣花酸(Ellagic 性的影响，为寻找预防和治疗AD的理想药物提供依据。另外，在实验中通过比 h和 (2)A1342(10pM)与Res(0、10、1001．tM)共同孵育，分别于28 3 Electron d各取样10此，通过透射电镜(Transmission 察Res对A1342聚集过程的影响； (3)A1342(40lxM)与Res(400pM)共同孵育，以单独孵育的A1342为对 h、18h、24 照，分别于0h、11h、15 h取样，通过圆二色谱仪(CircularDichroism． CD)检测Res对A1342二级结构变化的影响； immunosorbent (4)酶联免疫吸附试验(Enzyme．1inkedassay,Elisa)和斑 (6)细胞毒性分析实验(MTT法)检测Res对A胆所致细胞毒性的影响。 2、EA对A1342聚集及细胞毒性的影响 h、6h、12h、 (1)A1342(10lxM)和EA(100laM)共同孵育，分别于2 24 h取样10肛L，以单独孵育的A1342为对照，观察聚集过程的变化； (2)Ap42与EA共同孵育6 育形成蛋白的差异； h和24h， (3)A1342(10uM)和EA(100lxM、300pM)共同孵育12 影响； h、4h、6 (4)A[B42(40pM)与EA(300p,M)共同孵育，分别于0 h取 2 样，以单独孵育的AIM2为对照，通过圆二色谱仪检测EA对A1342二级结构变 化的影响； (5)MTT法检测不同浓度EA对AIM2所致细胞毒性的影响。 3、A131．16毒性及炎症反应的研究 N端