医学分子生物学-上课用-11.疾病产生的分子基础资料.ppt

* 点突变是单个碱基的改变 缺失是一个或多个核苷酸的丢失 插入是一个或多个核苷酸的增加 倒位是一段核苷酸序列方向倒转 基因突变还分为配子突变与体细胞突变 动态突变指串联重复拷贝数随世代的传递而改变：微卫星DNA在世代传递中试比较稳定的。 * 点突变是单个碱基的改变 缺失是一个或多个核苷酸的丢失 插入是一个或多个核苷酸的增加 倒位是一段核苷酸序列方向倒转 基因突变还分为配子突变与体细胞突变 动态突变指串联重复拷贝数随世代的传递而改变 * * * * * 移码突变(frame-shift mutation) 1)密码子缺失或插入 2)整个基因或基因大片段缺失 血红蛋白是由4条肽链（两个α和两个β链）组成的。每条肽链都类似于肌红蛋白的肽链，都结合一个血红素。 * 正常β-珠蛋白多肽链（HbA）：第六位密码子GAG，编码Glu； 镰状细胞贫血症患者β-珠蛋白多肽链（HbS）：第六位密码子GTG，编码Val； * 2. 家族性高胆固醇血症 LDL 受体基因变异，导致其编码蛋白结构异常，功能下降或完全丧失。 配体结合结构域，由LDL受体蛋白N端292个氨基酸残基组成，富含半胱氨酸。该结构中有7个由40个氨基酸残基组成的重复序列(天冬-半胱-X-天冬-甘-丝-天冬-谷)，每个重复序列中含有6个半胱氨酸残基，全部42个半胱氨酸。 * 胚胎发育过程中, AFP增强子激活;出生后, AFP沉默子处于活化状态。 在异常细胞增殖信号的作用下, c-myc、c-fos、c-jun等癌基因表达异常增加,其表达产物与 AFP基因顺式作用元件结合,激活 AFP基因表达。 AFP与其膜受体结合，影响TNF及其受体表达，导致肝癌细胞逃避免疫监视，并促进其生长。 * 异常的DNA甲基化（不同的DNA甲基化模式形成不同的表观遗传特征） hCG5′转录起始区低甲基化→非滋养层细胞hCG ↑ →受体结合→ ⊕cAMP →Tumor ↑ 人绒毛膜促性腺激素(hCG) * 新合成的蛋白质翻译后加工主要过程： 去信号肽、基团修饰、折叠、亚基聚合、运输（至靶作用部位）等 * 酪氨酸酶催化结构域点突变可以使酪氨酸酶的活性降低甚至消失，黑色素合成减少或不能合成，导致Ⅰ型泛素性白化病; 酪氨酸酶催化结构域以外的点突变导致色素缺失，蛋白质不能正确折叠，没有正常折叠的酪氨酸酶不能从内质网输出而滞留在内质网,无法完成其成熟及运输过程。 * * 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是一种中枢神经系统退行性病变的疾病。临床上首先表现为近期记忆力降低，继而表现持续性智能衰退、失语、判断推理能力丧失，以及运动障碍等。AD最显著的神经病理组织学特征是老年斑和神经原纤维缠结。现已发现，β-淀粉样蛋白在老年斑的形成过程中起十分重要的作用 。 * 在人类基因组中，中心突变可发生在编码区，也可发生在非编码区，但在进化过程中，编码区形成了较强的保守性，非编码区则保守性较小，中心突变发生频率较高，并可在群体中稳定地遗传，成为一种遗传标志。 通过家系分析有可能区分双亲的两条染色体，确定其中哪条具有正常基因，那条带有缺陷的致病基因。如果双亲的染色体能够完全区分，基因诊断率可达 100 %，如果双亲中只有一方的染色体能够区分，则只能作出 50 % 的排除诊断。所以，连锁分析具有一定的局限性 * 随着人类基因组草图测定的完成，宣告了“ 后基因组时代 ”的到来。功能基因组学成为研究的重心，蛋白质组学的研究受到了空前的关注，也为疾病相关基因的克隆创造了条件。 * 同一种细胞或组织，处于不同的状态（生理与病理等），发育的不同阶段，受到外界的不同影响时，都可能使细胞中蛋白质的情况产生相应的变化，从而产生不同的蛋白质组。蛋白质组学关注和研究的就是这些变化。 * 研究蛋白质与疾病相互关系的方法 ELISA 免疫印迹 免疫沉淀 蛋白质亲和层析 毛细管电泳 * * * 噬菌体展示技术 * 丝状噬菌体基因 基因 编码产物 功能 gI pI 噬菌体装配 gII pII 噬菌体基因组复制 gII pIII 尾端外壳蛋白，与F因子结合 gIV pIV 噬菌体装配 gV pV 噬菌体基因组复制 gVI pVI 外壳蛋白，末端“塞子” gVII pVII 外壳蛋白，高度疏水，组装起始信号 gVIII pVIII 主要外壳蛋白 gIX pIX 外壳蛋白，高度疏水，末端“塞子” gX pX gIII启动子激活蛋白 * * * 建 库 * 筛选 * * 核糖体展示 (ribosome display)  核心是利用体外核糖体表达载体构建 sc Fv抗体库 ,并于体外转录为 m RNA, 体外翻译表达 , 随后以固相化的抗原分子亲和筛选出核糖体 -m RNA-s