医学分子生物学-上课用-15蛋白质生物合成资料.ppt

人类细胞中HSP蛋白质家族可存在于胞浆、内质网腔、线粒体、胞核等部位， 涉及多种细胞保护功能：如使线粒体和内质网蛋白质保持未折叠状态而转运、跨膜，再折叠成功能构象； 通过类似上述机制，避免或消除蛋白质变性后因疏水基团暴露而发生的不可逆聚集，以利于清除变性或错误折叠的多肽中间物等。 * 约有85%的蛋白质能够自发折叠或者在热休克蛋白的帮助下折叠，还有约15%的蛋白质需要热休克蛋白和伴侣素的共同作用下才能完成正确折叠。 经过多次的结合和解离，使多肽链得到正确折叠。 朊病毒能引起致命的神经退化性疾病，疯牛病与此有关。阮病毒蛋白能复制，即少量的朊病毒蛋白可促进较多的正常蛋白质通过改变折叠方式变成朊病毒蛋白。 二硫键异构酶在内质网腔活性很高，可在较大区段肽链中催化错配二硫键断裂并形成正确二硫键连接，最终使蛋白质形成热力学最稳定的天然构象。 * 还有多种疾病被认为是蛋白质折叠病：囊性纤维性病变、家族性高胆固醇血症、白内障及某些癌症。 * 单体蛋白 寡聚蛋白或多聚蛋白：生物体内功能蛋白大多数以寡聚体的形式存在。如胶原蛋白、细胞骨架蛋白、病毒外壳蛋白等结构性蛋白，及免疫球蛋白、变构酶及血红蛋白等功能性蛋白。 * 在蛋白质生物合成水平上能够直接掺入的氨基酸通常只有20种，可实际存在于蛋白质中的氨基酸种类要超过20种，原因之一就是个别氨基酸的共价修饰。如胶原蛋白中的羟赖氨酸和羟脯氨酸。 金属酶：酶蛋白分子中含有紧密结合的金属离子，已成为酶蛋白结构中必不可少的组成部分，在纯化过程中也不会使金属离子丢失。 金属激活酶：单纯蛋白质，但其发挥活性时必须与金属离子结合。 金属在酶中只有少数单纯发挥稳定酶蛋白构象的作用，大多数作为酶活性中心的必须部分参与酶的催化作用。 * 在蛋白质生物合成水平上能够直接掺入的氨基酸通常只有20种，可实际存在于蛋白质中的氨基酸种类要超过20种，原因之一就是个别氨基酸的共价修饰。如胶原蛋白中的羟赖氨酸和羟脯氨酸。 某些转录共激活因子也是乙酰化酶 HAT不仅能使组蛋白乙酰化，还能使某些与转录相关的非组蛋白乙酰化。如转录因子E2F、P53等，调节基因的转录。 有证据显示，HAT具有抑瘤功能。HDAC抑制剂也能抑制肿瘤细胞生长。 蛋白质的靶向输送与翻译后修饰过程同步进行。 蛋白质合成后，有些留在胞浆中，有些需要被转运、锚定到特定的细胞器中。 * 信号序列是决定蛋白质靶向输送特性的最重要元件，提示指导蛋白质靶向输送的信息存在于蛋白质自身的一级结构中。 * 游离的核糖体支合成供线粒体和叶绿体膜装配的蛋白质；另一部分蛋白质，由新合成肽链的N端信号肽控制与内质网结合，使滑面内质网变成粗面内质网，在此合成三类主要蛋白质：溶酶体蛋白、分泌到胞外蛋白和构成质膜骨架蛋白。 真核细胞分泌型蛋白质的靶向输送过程为：核糖体上合成的肽链先由信号肽引导进入内质网腔并被折叠成为具有一定功能构象的蛋白质，在高尔基复合体中被包装进分泌小泡，转移至细胞膜，再分泌到细胞外。 高尔基体的作用：1.对糖蛋白上的寡聚糖进一步修饰和调整；2.将各种蛋白质进行分类并送往溶酶体、分泌粒及质膜等目的地。 蛋白质6-磷酸甘露糖基化是靶向输送至溶酶体的信号 * 靶向输送至内质网的蛋白质C-端含有滞留信号序列：与分泌型蛋白质一样，内质网中的驻留蛋白质先经粗面内质网上的附着核糖体合成并进入内质网腔，然后随囊泡输送到高尔基复合体。但是，内质网蛋白质多肽链的C-端含有滞留信号序列，可与相应受体结合。在高尔基复合体上，内质网蛋白质通过其滞留信号序列与受体结合后，随囊泡输送回内质网。 * （二）线粒体蛋白质以其前体形式在胞液合成后靶向输入线粒体 * 定向肽识别并结合到线粒体外膜的受体上，再利用由线粒体外膜转运体（tom复合体）和内膜转运体（Tim复合体）共同组成的跨莫通道；为了通过线粒体膜，需要借助肽链结合蛋白的帮助，进行新生肽链的去折叠和跨膜；跨膜之后蛋白质前体的信号序列被蛋白酶切，在分子伴侣的作用下折叠成有功能的蛋白质。 膜间隙蛋白的转运：如细胞色素C1的转运，其前体蛋白的N端有2个信号序列，第一个肽被线粒体外膜上的受体识别结合，引导至膜上的跨膜通道并得以进入线粒体内的基质中，此时第一个信号肽被切除；随后，第二个信号肽以类似的方式，携带肽链穿过内膜，进入膜间隙，第二个信号肽被切除，细胞色素C1折叠成天然结构，并与血红素分子结合形成功能蛋白。 （三）细胞核蛋白在胞液中合成后经核孔靶向输送入核 * 核输入受体：二聚体，和α、β两个亚基构成。 Ran蛋白是一种GTP酶。 * （二）线粒体蛋白的靶向运输 绝大部分线粒体蛋白质是由核基因组编码、在胞液中的游离核糖体上合成后释放、靶向输送到线粒体中的。 线粒体有外膜、内膜、膜间隙、基质构成，不同区域的蛋白质转运途径不同。 真核细胞