化学与生物参数方案.ppt

* 微生物的发酵是在一定条件下进行的，其内在代谢变化规律是通过各种检测装置测出的参数反应出来的。这样就可在严格监视下进行发酵，使产物的产量达到理想的程度。与微生物发酵有关的参数，可分为物理、化学和生物三类。这里介绍各个参数的意义及作用。 * 化学、生物参数 * 引言 微生物发酵的生产水平取决于生产菌种本身的性能，和合适的环境条件、才能使它的生产能力充分表达出来。我们通过各种研究方法了解有关生产菌种对环境条件的要求，了解生产菌在合成产物过程中的代谢调控机制以及可能的代谢途径，为设计合理的生产工艺提供理论基础。 通过各种监测手段如取样测定随时间变化的菌体浓度、糖、氮消耗及产物浓度，以及采用传感器测定发酵罐中的培养温度、pH、溶解氧等参数的情况，并予以有效地控制，使生产菌种处于产物合成的优化环境之中。 一般来说，菌种的生产性能越高，使其表达它应有的生产潜力所需的环境条件就越难满足。高产菌种比低产菌种对工艺条件的波动更为敏感。 化学工程和计算机应用的发展为发酵工艺控制打下另一方面的基础。 研究发酵动力学，找出适于描述和真正能反映系统的生化反应过程的数学模型，通过现代化的试验与计算手段，相信不久定能为发酵的优化控制开创一个新的局面。 第二节 发酵过程的主要参数 化学参数 生物参数 间接参数 1、化学参数 检测参数 检测方法 单位 影响及作用 PH 复合玻璃电极 菌体和产物合成速度 酶促反应的方向 基质浓度 产物浓度 HPLC 离子选择电极 生物传感器 取样 g?L-1 μ qP 发酵周期的长短 氧化还原电位 氧化还原电位电极 mV 生长和生化活性 溶氧浓度 覆膜氧电极 % qo2 气相O2含量 顺磁氧分析仪 Pa 反映OUR 和 Kla 气相CO2含量 红外气体分析仪 % 反映OUR 和 Kla 2、生物参数 检测参数 检测方法 单位 影响 菌丝形态 摄像显微镜 取样镜检 反映菌体发育阶段 和正常与否 菌体浓度 取样 ：干重、浊度、活菌计数、离心沉降 g?L-1 影响菌体的生化反应 Kla 一、化学参数 1、pH 发酵过程中各种产酸，产碱生化反应的综合结果，与菌体生长和产物合成有重要的关系。 pH的高低与菌体生长和产物合成有着重要的关系。 指发酵液中糖，氮，磷与重要营养物质的浓度。 基质浓度的变化对产生菌的生长和产物的合成有重要影响，也是提高代谢产物产量的重要控制手段。 2、基质浓度 氧是微生物体内一系列细胞色素氧化酶催化产能反应的最终电子受体，也是合成某些产物的基质。 利用DO浓度的变化，可以了解微生物对氧利用的规律，反映发酵的异常情况，是一个重要的控制参数。 3、溶解氧（DO）浓度 培养基氧化还原电位是影响微生物生长及其生化活性的因素之一。对各种微生物而言，培养基最适宜的与所允许的最大电位值，应与微生物本身的种类和生理状态有关。 4、氧化还原电位 是发酵产物产量高低，代谢正常与否的重要参数，也是决定发酵周期长短的根据。 5、产物浓度 尾气中O2浓度与生产菌的摄氧率和KLa有关。 尾气中CO2是产生菌呼吸放出的CO2。 从尾气中O2和CO2浓度的含量可以算出产生菌的摄氧率、呼吸商和发酵罐的供氧能力，从而了解产生菌的呼吸代谢规律。 6、尾气O2浓度和CO2浓度 菌体RNA, DNA含量，以及ATP, ADP, AMP体系，NAD(P)-NAD(P)H体系。分别表示菌体生长情况，能量代谢能力，生物合成能力。 7、其它参数 二.生物参数 1.菌体形态 发酵过程中菌体形态的改变是生化代谢变化的反映。一般都以菌体形态作为衡量种子质量，区分发酵阶段，控制发酵过程的代谢变化和决定发酵周期的依据之一。菌体形态的观察一般在显微镜下进行。 1、菌（丝）体浓度（生物量biomass） 菌体浓度的大小和变化速度对生化反应有影响，特别是对抗生素等次级代谢产物的发酵，菌体浓度与培养液的粘度，DO都有关。 三、间接参数 根据发酵液的菌体量和单位时间的菌浓、溶氧浓度、基质浓度和产物浓度等参数的变化值，可分别计算出菌体的比生长速率、氧的比消耗速率、基质的比消耗速率和产物比生产速率。 摄氧率r：单位体积培养液每小时所消耗的氧量（mmol/L.h） 1、摄氧率 呼吸强度QO2：单位重量的干菌体每小时所消耗的氧量（mmol/g.h） 2、呼吸强度 呼吸商RQ：发酵过程中氧的消耗比速与二氧化碳生成比速的商 3、呼吸商 参数名称 单位 测试方法 意义、主要作用 pH 基质浓度 溶解氧浓度 氧化还原电位 产物浓度 尾气氧浓度 尾气CO2浓度 菌体浓度 RNA、DNA含量 ATP、ADP、AMP NADH含量 摄氧率 呼吸强度 呼吸商 比