Mig6表达缺失和非小细胞肺癌恶性演进的关系及对肺癌细胞凋亡的影响和调控机制.pdfVIP

目录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………1 英文论著摘要……………………………………………………………………6 二、英文缩略语………………………………………………………………………12 三、论文 前言……………………………………………………………………………13刚舌……………………………………………………………………………13 材料与方法……………………………………………………………………13 实验结果………………………………………………………………………17 讨论……………………………………………………………………………24 结论……………………………………………………………………………25 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………26 五、参考文献…………………………………………………………………………27 六、附录 综j苤……………………………………………………………………………30 在学期间科研成绩……………………………………………………………35 致谢……………………………………………………………………………36 个人简介………………………………………………………………………37 ·中文论著摘要· Mig-6表达缺失与非小细胞肺癌恶性演进的关系及对 肺癌细胞凋亡的影响和调控机制 刖 看 肺癌是当今世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，约占恶性肿瘤致死率的 30％。肺癌中非小细胞肺癌(non-smMlcell lung 主要包含两种组织学类型：腺癌和鳞癌。肺癌的防治是全世界共同面对的一项难 题，尽管针对肺癌的外科手术、化疗和放疗的己取得长足进步，但疗效依旧不理 想，五年生存率很低。 丝裂原诱导基因6(mitogen-induciblegene．6，Mi争6)最早是在对细胞周期的 研究中发现的。Mig．6是一种早期反应基因，可受多种细胞外刺激诱导，例如生 长因子、低氧状态和压力信号等。据文献报道，它在人体分布广泛，可以负向调 控表皮生长因子受体(EGFR)下游靶基因的活化，在小鼠模型中，下调Mig．6 的表达，可引起肺、膀胱、胆管以及消化道的肿瘤发生，提示Mig．6并可能与多 种肿瘤的发生有密切关系。进一步研究提示，Mig-6在多种人类肿瘤中表达下调， 提示其可能扮演着抑癌基因的角色。 但是，Mig-6在非小细胞肺癌中的表达及其与临床病理因素的关系尚不明确， Mig．6的变化对肺癌细胞凋亡的影响也未有研究。为了明确以上问题，我们检测 的关系，并进一步探讨了Mig-6对肺癌细胞凋亡的影响及其相关机制。 材料与方法 1、组织标本来源 本研究获得中国医科大学伦理委员会的批准，150例肺癌组织及20例癌旁『F 第一医院手术的病人，组织经10％中性福尔马林固定，石蜡包埋。这些患者在手 术前均未接受放化疗，并已知情其切除组织用于诊断后剩余部分会被保存及用于 科学研究，其医疗记录会被用于后续随访，但隐私会被严格保密。肿瘤的组织学 诊断、分化程度和分期通过伊红苏木素染色后根据世界卫生组织分类标准和国际 抗癌联盟的肺癌TNM分期标准(第七版)进行判定。150例肺癌标本中，鳞癌 69例，腺癌81例，伴发淋巴结远端转移60例。 2、细胞培养和转染 胞系由北京大学郑杰教授惠赠。细胞使用RPMI1640培养基含10％的灭活小牛 DharmaFECTl。mRNA和蛋白检测均在转染或干扰后48小时进行。 3、免疫组织化学染色 组织经10％中性福尔马林固定，石蜡包埋。将石蜡包埋的肺癌组织块切成4 gm厚切片，癌旁的正常支气管上皮作为阴性对照。以PBS代替一抗作为空白对 照。使用即用型非生物素免疫组化EliVisionTM plus检测试剂盒(迈新，福州，中 国)及Mig．6多克隆抗体(1：100)进行免疫组化染色。两位病理医生对切片分别 作出判定，每张组织切片随机观察5个高倍视野(x400)，每个视野共计数100 个癌细胞，阳性率根据阳性癌细胞所占百分比计算。M