微生物的实验室培养上课用讲解.pptVIP

灭菌 培养基灭菌：高压蒸汽灭菌锅中，100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。 培养皿：旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。 倒平板技术 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。 也能防止培养基中水份过快挥发。 答：不能。空气中杂菌会粘附在这些培养基上繁殖，并污染皿内培养基。 （二）、纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面. 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落. 微生物的接种技术 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 菌落 细菌的菌落特征因种而异 霉菌的菌落特征 因种而异 菌落 接种环 接种针 平板划线法 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环：避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 每次划线前灼烧接种环：杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种 划线结束后灼烧接种环：杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：防止接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 涂布器 专题2 :微生物的培养与应用 微生物包括哪五类： 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 微生物基础知识 一、基础知识： （一）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定等。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。 1.培养基的类型和用途 一、培养基 概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 固体培养基（凝固剂，琼脂） —用于微生物的分离、计数、鉴定 液体培养基（无琼脂） —常用于工业生产 分类 培养基的种类 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 据物理性质分 天然培养基 合成培养基 据化学成分分 选择培养基 鉴别培养基 据用途分 常用于工业生产 常用于观察微生物的运动、鉴定菌种 用于微生物的分离、计数 常用于工业生产 常用于分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长。 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。 标准 培养基类型 配制特点 主要应用 物理性质 固体培养基 加入琼脂较多 菌种分离,鉴定, 计数 半固体培养基 加入琼脂较少 菌种保存 液体培养基 不加入琼脂 工业生产，连续 培养 化学组成 合成培养基 由已知成分配制而成， 培养基成分明确 菌种分类、鉴定 天然培养基 由天然成分配制而成， 培养基成分不明确