Bufalin对人食管癌细胞ERKPERK与细胞迁移能力的影响.pdfVIP

中文摘要 BufaI i n对人食管癌细胞ERK／p_E眯和细胞迁移能力的影响 摘 要 食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一，其发生是多因素作用、多基因参 与、多阶段共同发展的疾病，然而其发生发展的确切机制尚不明确。我国 是世界上食管癌死亡率最高的国家之一，每年有不少人死于食管癌。由于 其早期症状不明显，不易察觉，到确诊时已属中晚期，故预后较差。尽管 近些年来通过普查使得食管癌早发现早诊断早治疗的水平有所提高，食管 癌的预后有所改善，但五年生存率仍较低。因此，继续寻找新的抗肿瘤药 物，并了解其在肿瘤发生发展过程中作用的信号转导通路成为食管癌临床 治疗研究的重点。 酶促级联反应，并通过转染高活性MEK质粒来研究食管癌细胞中 从中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍的耳后腺及皮肤腺的干燥分泌物提取的主要活 性成分之一，属于一种强心苷类物质，己被用来作为一种传统的中医治疗 感染、肿瘤以及麻醉)来有效的阻断通路信号的异常传导，降低各个因子 的活化水平，从而达到抑制肿瘤因子异常增殖和迁移的作用。Bufalin在 临床上多有报道，但尚未应用于食管癌的治疗，本实验室的前期实验证实， ERK通路中各个因子的活化达到抑制食管癌发生发展的作用。本实验就 进行研究，从而多方面验证Bufalin在食管癌中的作用，为临床能够更好 的治疗食管癌提供可靠的实验依据与新的治疗方向。 为了更好的研究食管癌发生发展的具体机制以及治疗食管癌的方案， 本实验继续使用了食管癌细胞株TEl3进行人体外的研究，旨为了解在食 的服务于临床打下坚实的基础。 中文摘要 影响 方法： 1将携带高活性MEK基因的质粒转化至DH5a大肠杆菌中进行扩增， l3 并使用脂质体法将携带高活性MEK基因的质粒成功转染到食管癌TE 细胞中，使用Western 42h、48h后细胞内ERK表达及其活化情况的变化，并得出转染的最佳时 间。 2用WesternBlot方法分别检测不同处理组(对照组、空载体转染组、 的影响。 3采用细胞划痕实验分别测量不同处理组(普通培养组、空载体转染 较，．进而研究不同处理组对细胞迁移能力的影响。 结果： l成功将高活性MEK质粒扩增并转染到食管癌细胞中，并检测到其 0．05)，无显著性差异。而P．ERK在对照组和空载体组中亦无明显变化， 但在高活性MEK质粒转染组中的活化水平明显升高，且随转染后时间的 统计学意义。 2Western 中文摘要 0．432±0．007，P0．05)，差异具有统计学意义。 3划痕实验结果显示：不同的处理组在划痕36h后与对照组相比迁移 的距离不同，在高活性MEK质粒转染组明显大于其他各组，差异具有统 结论： 1直接转染高活性的MEK质粒可进一步激活其下游的ERK，使 表达并不受转染时间的影响。 的表达在不同处理组间无明显变化。 3 作用。 B10t； 划痕实验 英文摘要 TheeffectofBufalinin andcell in ERK／p·-ERKmigration human cancercells esophageal cancerisoneofthecommon tumoursin Esophageal malignant human．It is that factors inthe of commonlyacceptedma