大黄素对豚鼠胃窦平滑肌细胞L型钙通道电流影响.pdfVIP

目 录 一、摘要……………………………………………………………………1 (一)中文摘要…………………………………………………………1 (二)英文摘要………………………………………………………3 二、正文…………………………………………………………………6 (一)丹U舌“一一”一…一…………“一…””一”一一……””…一一”一一6(一)前言……………………………………………………………6 (二)材料与方法……………………………………………………7 OOOO (三)结果……DO…………………………………………………12 (四)讨论……………………………………………………………16 OOO OOOOOOQ O………………………………18 (五)结论…………………O O O OO (六)参考文献……………………………………BO……………19 三、综述………………………………………………·……·j…………2l (一)综述…………………………………………………………21 (二)参考文献………………………………………………………26 四、致谢…………………………………………………………………29 大黄素对豚鼠胃窦平滑肌细胞L一型钙通道电流的影响 硕士生姓名： 法欣欣 指导教师： 段志军教授 指导小组： 郭慧淑教授 专业名称： 内科学 摘要 目的：胃肠动力学及其疾病的研究是近年迅速发展起来的新兴科学，寻找引 起胃肠运动障碍的原因对消化道动力障碍性疾病的治疗具有重要意义。中药方剂 大承气汤对胃动力的影响及其参与调节胃动力机制的研究尚少，本文的主要目的 即研究其主要有效成分大黄素(Emodin)对豚鼠胃窦平滑肌细胞膜L一型钙通道电 流(Ica)的影响，以探讨其调控胃肠动力的机制。 方法：采用传统全细胞模式的膜片钳技术，记录正常豚鼠胃窦平滑肌细胞的L- EmodinPSS的和 IB。代替lc。进行研究。分别用含Ba2+的PSS(生理盐溶液)、101aM 响、对IB。的电流．电压曲线的影响及对IB。的稳态激活和失活特性的影响，记录每 组均应完整记录六例以上。 结果：在全细胞膜片钳记录模式下，持续用含Ba2+的细胞外液灌流细胞，将 细胞膜电位钳制在．80mV，给予时程为400ms，从．80mV直接阶跃到0mV的单一 去极化脉冲刺激，且这个脉冲刺激每隔10s重复一次。实验中记录到多条单一Ic。 待电流稳定后在细胞外液中加入不同浓度的Emodin。以加药前的电流作为对照的 结果显示，不论是加入10I．tM 表现为lB。电流峰值明显增大，而且这种激活作用呈现时间依赖性。 实验结果显示，不同浓度Emodin对IB。的影响是具有电压依赖性的。在细胞 mV--,+30 mV的电压范围内均可以明显 外液中加入101aMEmodin后，在膜电位．10 入药物后，在膜电位一20mV--+40 mV的电压范围内均可以明显的激活IB。电流(· 值都没有显著影响。 将细胞膜电位钳制在．80mV，采用时程400ms，从．60mV～+60mV，步阶电位为 10mV的去极化脉冲刺激，即可得到一系列对应于不同膜电位的电流值。使用 进行曲线拟合，得到给药前后的稳态激活曲线。其中V。1，2为半数最大激活电压，1c 为斜坡因子。统计分析发现10