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选修三 现代生物科技专题 专题1、基因工程 作为载体的必要条件: 1、能自我复制或整合到受体染色体DNA上 随染色体DNA的复制而同步复制; 2、有一或多个限制酶的切割位点; 3、必须带有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择 4、对受体细胞无毒害 5、大小应合适,便于提取和体外操作。 基因治疗的方法 用于基因治疗的基因种类 ①正常基因:从健康人体上分离得到的功能正常的基因,用以取代病变基因,或依靠其表达产物。 ②反义基因。即通过产生的mRNA分子,与病变基因产生的mRNA 进行互补,来阻断非正常蛋白质的合成。 ③自杀基因:即编码可以杀死癌变细胞的蛋白酶基因。 3、将目的基因导入微生物细胞 常用法:Ca2+处理 常用受体细胞:大肠杆菌 微生物作受体细胞原因: 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 过程: Ca2+处理大肠杆菌 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA (用Ca2+处理,增加细菌细胞壁的通透性) 处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态的细胞 (1)________________→目的基因的有无 (2)分子杂交技术→_________________ (3)_______________→目的基因是否翻译 (4)生物性状的表达与否→目的基因是否表达 (个体水平) DNA分子杂交技术 目的基因是否转录 抗原—抗体杂交 分子水平 四、目的基因的检测与鉴定 检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 1、导入检测 目的: 方法: DNA分子杂交技术 过程: ①.首先取出转基因生物的基因组DNA ②.将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针。 ③使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表明目的基因已插入染色体DNA中 四、目的基因的检测与鉴定 从转基因生物中提取的基因组DNA 探针: 杂交的对象: 用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段 15N 15N 14N 探针 转基因生 物的DNA 变性 变性 14N 2、转录检测 目的: 检测目的基因是否转录出了mRNA 方法: 分子杂交技术 用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段 探针: 杂交的对象: 从转基因生物中提取的mRNA. 3、翻译检测 目的: 检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法: 抗原抗体杂交技术 从转基因生物中提取的蛋白质 抗原: 抗体: 将目的基因编码的蛋白质注射进动物体内进行免疫产生的相应抗体 4、个体生物学水平的鉴定 抗虫鉴定、抗病鉴定、 活性鉴定等 1.转基因植物 抗病 抗逆 改良 抗虫 应 用 实 例 类别 杀虫的基因主要有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等 抗病毒基因:病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因; 抗真菌基因:几丁质酶基因和抗毒素合成基因 抗盐碱和抗干旱的调节细胞渗透压基因、 抗冻蛋白基因、抗除草剂基因 ①转基因玉米中赖氨酸的含量比对照提高30% ②转基因延熟番茄储存时间可延长1~2个月 ③转基因矮牵牛呈现出自然界没有的颜色变异 1、3 基因工程的应用 2.转基因动物 改善畜 产品品质 生产药物 作器官移 植的供体 提高生 长速度 应 用 实 例 类别 如转外源生长激素基因绵羊和转外源生长激素基因鲤鱼生长速率快、体型大 如将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,使获得的转基因牛分泌的乳汁中,乳糖的含量大大减低,而其他营养成分不受影响 目前,已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α-抗胰蛋白酶等重要药品 科学家正试图利用基因工程方法对猪的器官进行改造,抑制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官 3.基因工程药物 (1)来源:转基因的_______。 (2)成果:_________、抗体、_____、激素等。 (3)作用:预防和治疗_________、心血管疾病、 _______、各种传染病、糖尿病、类风湿等疾病。 4.基因治疗 (1)方法:把_________导入病人体内,使该基因的表达产物 发挥功能。 (2)效果:治疗_______的最有效的手段。 (3)分类:_____基因治疗和_____基因治疗。 工程菌 细胞因子 疫苗 人类肿瘤 遗传病 正常基因 遗传病 体内 体外 ①体外基因治疗: 从病人体内获得某种细胞,进行培养,然后,在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内。 直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法。 ②体内基因治疗: 干扰素是动物体内合成的一种蛋白质,可以用于治疗病毒感染和癌症,但体外保存相当困难,如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸,就可在-
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