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原核生物mRNA的S-D序列及其与16SrRNA的结合 三、蛋白质生物合成过程 蛋白质的生物合成过程包括: ①氨基酸的活化与转运 ②活化氨基酸在核糖体上形成多肽链。后者是蛋白质生物合成的中心环节,又称核糖体循环。 ③翻译后加工 第二节 蛋白质生物合成的基本过程 氨基酸的活化与转运(准备阶段) 肽链合成的起始 肽链的延长 肽链的终止 翻译后的加工修饰 氨基酸与tRNA的结合需要氨酰tRNA合成酶催化,并需要消耗ATP。 一、氨基酸的活化与转运 氨基酸 + tRNA 氨基酰- tRNA ATP AMP+PPi 氨基酰-tRNA合成酶 氨基酸的活化是指氨基酸与tRNA结合为氨基酰-tRNA的过程,称为氨基酸的活化。 在胞质中进行。 氨基酸 +ATP-E 氨基酰-AMP-E + PPi 第一步反应 第二步反应 氨基酰-AMP-E + tRNA 氨基酰-tRNA + AMP + E 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 绝对专一性: 1个A.A对应1个氨基酰tRNA合成酶 催化反应: 活化A.A-活化“-COOH”,消耗2个ATP,产 物—氨酰tRNA 酶的两个位点: 结合位点-结合正确的A.A,活化 水解位点-保证A.A序列的正确性(校正活性) 氨基酰-tRNA合成酶 二、肽链起始阶段 是指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物的过程。 基本过程: 1. 核蛋白体大小亚基分离; 2. mRNA在小亚基定位结合; 3. 起始氨基酰-tRNA的结合; 4. 核蛋白体大亚基结合。 指在mRNA模板的指导下,氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。 1. 进位/注册 2. 转肽 3. 移位 三、肽链延长阶段 肽链延长在核蛋白体上连续循环式进行,包括以下三步: 每轮循环使多肽链增加一个氨基酸残基。 1. 进位 又称注册, 是指一个氨基酰-tRNA按照mRNA模板的指令进入并结合到核蛋白体A位的过程。 进位需要延长因子EF-Tu与EF-Ts参与。 2.转肽 转肽是在转肽酶的催化下,核蛋白体P位上起始氨基酰-tRNA的N-甲酰甲硫氨酰基或肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位并与A位上氨基酰-tRNA的α-氨基结合形成肽键的过程。 3. 移位 转位是在转位酶(延长因子EF-G)的催化下,核蛋白体向mRNA的3′-端移动一个密码子的距离,使mRNA序列上的下一个密码子进入核蛋白体的A位、而占据A位的肽酰-tRNA移入P位的过程。 移位需要延长因子EF-G参与。 进位 移位 成肽 肽链合成延长(核蛋白体循环)过程 四、肽链终止阶段 指核蛋白体A位出现mRNA的终止密码子后,多肽链合成停止,肽链从肽酰-tRNA中释出,mRNA、核蛋白体大、小亚基等分离的过程。 终止阶段需要释放因子RF-1、 RF-2和 RF-3参与。 RF-3可结合核蛋白体其他部位,有GTP酶活性,能介导RF-1、RF-2与核蛋白体的相互作用。 释放因子的功能: 识别终止密码子 RF-1特异识别UAA、UAG; RF-2特异识别UAA、UGA。 诱导转肽酶转变为酯酶活性 催化新生肽链与结合在P位的tRNA之间的酯键水解,使肽链从核蛋白体上释放。 第十二章 蛋白质生物合成 体内蛋白质合成的过程称为蛋白质生物合成。 将mRNA分子中核苷酸(或碱基)的顺序转变蛋白质分子中氨基酸残基的顺序的过程称为翻译。相当于,把核酸中的A、G、C、U/ T 4种碱基组成的遗传信息,破译为蛋白质分子中的20种氨基酸排列顺序。 翻译的过程有三个阶段:起始,延长,终止。 第一节 三种RNA在蛋白质生物合成中的作用 一、mRNA的模板作用 mRNA是蛋白质多肽链合成的直接模板。 mRNA将DNA的遗传信息传递给蛋白质,是基因表达时的中介,所以又称信使RNA。 每一种mRNA至少能指导合成一条多肽链。 遗传密码(又称密码子,简称密码):mRNA分子中含有AGCU四种不同的碱基所代表的核苷酸。从5→3方向每3个相邻的核苷酸组成一个三联密码即遗传密码。 可组成64种不同的密码。包含:20种氨基酸,起始密码,终止密码。 背景环境分析 蛋白质生物合成体系 基本原料:20种编码氨基酸 模板:mRNA 适配器:tRNA 装配机:核蛋白体 主要酶和蛋白质因子:氨基酰-tRNA合成酶、转肽酶、起始因子、延长因子、释放因子等 能源物质:ATP、GTP 无机离子:Mg2+、 K+ 背景环境分析 (一)mRNA是遗传信息的携带者 m
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