第2章核酸结构与功能解答.ppt

(二) tRNA的结构 氨基酸臂 OH ACCAGAGGGC CCCCC GCAAG CCG CUCUCGUA U C TΨ C C GGGGG GGC A A G m D D G G D D D A A C A G U U A A A A ψ GUUC C D m A A C A 反密码子环 反密码子 tRNA的二级结构 (1) tRNA的二级结构为平面卷曲的三叶草构型。 (2) 头部：反密码子环，与mRNA上的密码子配对。 (3) 尾部：氨基酸臂，携带活化的氨基酸。 (4) 不同的氨基酸需要不用的tRNA进行运输：反密码子与携带的氨基酸具有的对应性。 2. tRNA的三级结构 (三) tRNA的功能 1. 破译遗传密码（反密码子）； 2. 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译（氨基酸臂）。 X线衍射结构证明，tRNA的共同三级结构为倒L形。 (二) rRNA由单链卷曲构成的多茎环结构。 三、rRNA的结构与功能 (三) rRNA参与组成核糖体的大、小亚基，作为蛋白质生物合成的场所。 (一) rRNA占总RNA的80％以上。 (四) 根据沉降系数，rRNA在原核生物中有 5S,23S,16S 三种；在真核生物中有 5S,28S,5.8S,18S四种。 紫外吸收 由于嘌呤和嘧啶中含有共轭双键，核酸在260nm或附近处有最大吸收峰。该特点常用于核酸定量分析。 碱基的紫外光谱 240 250 260 270 280 波长(nm) 2000 4000 6000 8000 10000 12000 14000 分子消光系数 AMP GMP UMP CMP dTMP 第四节 核酸的理化性质 DNA的变性与复性 (一)变性 (denaturation) 1.定义 在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。本质是双链间氢键的断裂。 2.因素 强酸，强碱，高温，高压，变性试剂如尿素以及某些有机溶剂如乙醇等。 (二)复性 1.DNA复性(renaturation)的定义 (1)当变性因素去除后，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。 (2)热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 1.DNA复性过程中，将不同种类的DNA单链分子或RNA分子置同一溶液中，就可以形成杂交双链。 2.杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 (三)核酸分子杂交(hybridization) 3.核酸分子杂交的应用 （1）研究DNA分子中某一种基因的位置 （2）确定两种核酸分子间的序列相似性 （3）检测待检样品中是否存在某些专一序列 （4）该方法是基因芯片技术的基础 第五节 核酸酶 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶。 第五节 核酸酶 依据底物不同分类 DNA酶(DNase)：专一降解DNA。 RNA酶 (RNase)：专一降解RNA。 依据对底物作用方式不同 核酸内切酶：在DNA或RNA内部切断磷酸二酯键；核酸外切酶：水解核酸分子链末端的磷酸二酯键。 有5′→3′或3′→5′核酸外切酶。 5’ 5’ 3’ 3’ 外切位点 外切位点 内切位点 内切位点 参与DNA的合成、修复以及RNA的剪接。 清除多余的、结构和功能异常的核酸，以及侵入细胞的外源性核酸。 降解食物中的核酸。 体外重组DNA技术中的重要工具酶 。 核酸酶的功能 作业 1. 简述DNA双螺旋结构的特点 2. 简述tRNA的结构 * 米歇尔首先从白细胞核中发现一种含有磷和氮的物质。荧光定量PCR * 提问 * 3个OH的重要性 * 腺苷三磷酸（ATP adenosine triphosphate）是由腺嘌呤、核糖和3个磷酸基团连接而成，水解时释放出能量较多，是生物体内最直接的能量来源。 * * 提问。是一类长度约为20-24个核苷酸长度的具有调控功能的非编码RNA。 miRNA 主要参与基因转录后水平的调控。根据miRNA在人体中起到的调节蛋白生成的特殊作用，我们认为其在未来临床检测应用方面具有广阔的前景。 * 不均一核RNA * * * Deoxyribonucleases (or DNases) are enzymes that cleave phosphodiester bonds. Some are used for constructive purpo