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凝胶层析
凝胶层析,又称为凝胶过滤、分子排阻层析或分子筛层析。是以各种凝胶为固定相,利用流动相中所含各物质的相对分子质量不同而达到物质分离的一种层析技术。
其设备简单,操作方便,不需要再生处理即可反复使用,适用于不同相对分子质量的各种物质的分离,已广泛地用于生物化学、生物工程和工业、医药等领域。 ;发现历史;1. 基本原理
当含有各种组分的样品流经凝胶层析柱时,大分子物质由于分子直径大,不易进入凝胶颗粒的微孔,沿凝胶颗粒的间隙以较快的速度流过凝胶柱。而小分子物质能够进入凝胶颗粒的微孔中,向下移动的速度较慢(分子筛效应),从而使样品中各组分按相对分子质量从大到小的顺序先后流出层析柱,而达到分离的目的。;分子筛效应;;2. 凝胶过滤层析的特点;11;13;19;Ve=Vo+Kd·Vi;21;22;23;24;25;26;固相介质:凝胶颗粒(多孔的网状结构)
交联度或孔度(网孔大小)——凝胶的分级分离范围
交联葡聚糖——Sephadex G(1500-30000)
琼脂糖 ——Sepharose或Bio-Gel A
聚丙烯酰胺——Bio-Gel P
;28;29;30;31;32;33;34;35;36;37;38;39;40;41;42;43;44;45;46;47;48;49;50;51;52;53;54;55;56;57;58;59;60;61;62;63;64;65;66;67;68;69;70;71;72;73;74;75;76;77;78;79;80;81;82;83;84;85;86;87;88;89;90;91;92;93;94;95;96;97;98;99;
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