微生物课后习题汇编.doc

（二）微生物的5个共同特点  （小、多、快、强、广） 1、体积小，面积大 2、吸收多，转化快 3、生长旺，繁殖快 4、适应性强，易变异 5、种类多，分布广 第二章、微生物的纯培养和显微技术 一、何为无菌技术？试列举属于无菌技术范围的具体实验操作环节及注意事项。 无菌技术：在分离、转接及培养纯培养物是，防止其被其他微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术。 二．哪些固体培养基分离技术可以被用来获得目的微生物的纯培养？它们的适用范围及特点如何？（总结） 1. 涂布平板法 先将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板； 将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面； 经培养后挑取单个菌落； 是使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀。 2. 稀释倒平板法 稀释：先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000......）； 倒平板：然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板； 培养：保温培养一定时间即可出现菌落。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。 操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好。 平板划线法：操作简单，多用于已有纯培养的确定和再次分离。 4. 稀释摇管法：稀释倒平板的一种变通形式，但由于菌落形式在琼脂柱的中间观察和挑取困难 三、在何种情况下，你会选择使用液体分离法或单孢子（细胞）分离法来获得微生物的纯培养？（自己总结） 用液体培养基分离纯培养 一些细胞大的细菌、许多原生动物和藻类等，需要用液体培养基分离来获得纯培养。 接种物在液体培养基中进行顺序稀释，以得到高度稀释的效果，使一支试管中分配不到一个微生物。若稀释后同一梯度的平行试管中大多数（95％）没有，那么有微生物的可能是纯培养，否则可能性下降。 单细胞（孢子）分离：采取显微镜分离法从混杂群体中直接分离单个细胞货或单个个体进行培养以获得纯培养，叫单细胞分离法，适合较大的微生物，藻类，原生动物较易。 四、为什么说菌种保藏技术对于微生物学的研究和应用都具有重要意义？你认为哪些菌种保藏技术可被用于保藏大肠杆菌及枯草芽孢杆菌菌株？（答案自己总结） 微生物的保藏技术 菌种保藏目的：给微生物一特定的条件，使其不污染、不改变特性而存活下来。 菌种保藏方法 传代培养保藏——隔绝空气低温保藏 冷冻保藏——保护剂+菌种——零下196℃速冻保存，或-70℃冷冻室保存，-30~-20℃普通冰箱冷冻室保存。 干燥保藏——沙土管保存法和冷冻真空干燥保藏法 使用油镜时为什么要滴加香柏油？ 介质折射率提高，数值孔径值和分辨率均得到提高，香柏油与玻璃的折射率相近，很多原来由于在透镜及载片表面的反射和折射而损失的光线可以进入物镜,使照明亮度提高,改善观察效果。 哪些因素会影响显微镜测定的细菌细胞大小？如果在实验中偶然发现某菌具有特异的细胞形态，你该如何对待？ 1个体差异；2干燥、固定后的菌体会一般由于脱水而比活菌体缩短1/3-1/4；3染色方法的影响，一般用负染色法观察的菌体较大；4幼龄细菌一般比成熟的或老龄的细菌大；5环境条件，如培养基中渗透压的改变也会导致细胞大小的变化。 第三章、微生物细胞的结构和功能 一、试用表解法比较革兰氏阴性细菌和兰氏阳性细菌细胞壁的异同。 项目 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 细胞壁 厚度 厚 薄 层次 1 2 肽聚糖层厚度 厚 薄 磷壁酸 有 无 外膜 无 有 孔蛋白 无 有 脂蛋白 无 有 周质空间 无或窄 有 溶质通透性 强 弱 试述革兰氏染色机制。 细菌通过结晶紫初染和碘液媒染之后，在细胞膜内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物（CVI）。 G＋由于细胞壁厚，肽聚糖的含量高，网状结构层次多和交联致密，网孔小。故用乙醇（或丙酮）作脱色处理时，乙醇使细胞壁脱水，肽聚糖的网孔变得更小，透性降低。不含类脂，用乙醇处理也不会溶出缝隙，因此，乙醇不能透过细胞壁而把结晶紫—碘复合染料抽提出来；同时，乙醇不能进入细胞去脱色，故用番红复染时仍为紫色。（实际是紫色加红色） G－细胞壁，由于肽聚糖含量小，网孔大，又由于被乙醇脱水（脂）后，网孔进一步增大，所以在脱色时，结晶紫和碘的复合物被有机溶剂所提取，故只能显示后来的沙黄番红的红色颜色 、什么是缺壁细菌？试简述4类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。 1）L型细菌：细菌在某些环境条件下（实验室或宿主体内）通过自发突变 而形成的遗传