致畸胎实验.pptVIP

六、结果分析和评价 结果评定 1.致畸指数=雌性动物LD50/最小致畸剂量 评判标准： 致畸指数小于10为基本无致畸危害； 致畸指数大于10为有致畸危害； 致畸指数大于100为强致畸危害。 2. 相对致畸指数（RTI）=成年动物LD01（最小致死剂量）/诱发5％畸形发生率的剂量 评判标准：比值越大，致畸度愈大。 六、结果分析和评价 目 录 实验课授课 教学视频 标本观察讨论 目 录 实验课授课 教学视频 标本观察讨论 注意事项 该试验不能肯定或排除由于两性配子损伤所引起的畸形和胚胎毒性 给药剂量、时间、途径、动物敏感性对实验结果有明显影响 阴性（溶剂）对照也会有个别畸形或/和变异 某些畸形或变异如多肋、短尾不影响后代存活和健康；某些部位或器官的骨化迟缓，如胸骨、脊椎骨、趾骨、枕骨可在出生后赶上正常动物，属于胚胎毒性而非畸形。 5. 致畸作用中动物物种和品系差异较为显著，因此要求在两种动物进行试验。由于物种差异，对动物不具有致畸作用的外源化学物对人是否致畸的问题，应格外认真对待。 1.发育毒性的体内预筛试验（C.K. assay）：主要器官形成期接近母体毒性剂量染毒，观察出生后3天内外观畸形、胚胎死亡、生长迟缓等。 2.大鼠全胚胎培养（whole embryo culture, WEC）： 9~10天大鼠胚胎，旋转培养，观察胚胎存活和发育情况（心跳、血液循环，胚芽、卵黄囊直径、体节数、体长等） 发育毒性的替代实验 3.胚胎细胞微团培养（micromass culture）：从11天大鼠胚胎获取中脑区、肢芽等部位细胞微团，与化学物接触培养5天，不同染色后观察 4.小鼠胚胎干细胞试验（embryo stem cell test, EST）：胚胎干细胞（ES细胞）具有全能性和无限增殖能力，并能在体外培养，可诱导分化成各种类型的细胞，如心肌细胞。还可通过mRNA差异显示和基因芯片技术，研究不同分化阶段细胞的基因转录和表达，揭示发育和分化的分子机制 实验讨论 1.致畸指数=雌性动物LD50/最小致畸剂量，为什么在确定致畸指数反映外源化学物对人体致畸危害的时候要选用LD50作为对比？ 2.外源化学物发育毒性的特点和影响因素有哪些？ 3.观察标本后心得体会 实验报告1月7日前交到公卫楼923 联系电话* 反应停;最早抗惊厥药物以治疗癫痫，抗过敏药物但疗效欠佳。但研究人员在这两项研究过程中发现，反应停具有一定的镇静安眠的作用，而且对孕妇怀孕早期的妊娠呕吐疗效极佳。此后，在大鼠、兔子和狗身上的实验没有发现反应停有明显的副作用（事后的研究显示，其实这些动物服药的时间并不是反应停作用的敏感期），Chemie　Gruenenthal公司便于1957年10月1日将反应停正式推向了市场。反应停便成了“孕妇的理想选择”（当时的广告用语），在欧洲、亚洲、非洲、澳洲和南美洲被医生大量处方给孕妇以治疗妊娠呕吐。 到了1960年，欧洲的医生们开始发现，本地区畸形婴儿的出生率明显上升。这些婴儿有的是四肢畸形，有的是腭裂，有的是盲儿或聋儿，还有的是内脏畸形 * * * 以LD50为标准的，与视频范围不一致，如何解释 * * C7 T13 S6 * * 受精卵发育成熟过程中经历不同阶段，比如着床前期，器官形成期，胎儿期，围生期和出生后发育期，其中最容易发生畸形的是器官形成期： 人 妊娠3-8周 大小鼠 妊娠6-15天 家兔妊娠 6-18天 * 致畸胎实验原理： 母体在受孕期间受到可通过胎盘屏障的某种有害物质作用，影响胚胎的器官分化与发育，导致结构和机能的缺陷，出现胎儿畸形。 在受孕动物的胚胎着床后，并已开始进入细胞及器官分化期时投以受试物，可检出该物质对胎儿的致畸作用 * * * * 毒理学系 李霄 目 录 实验课授课 教学视频 标本观察讨论 目 录 实验课授课 教学视频 标本观察讨论 背景 反应停事件 背景 理论 20世纪50、60年代，由于大量孕产妇使用反应停作为治疗早孕反应药物，从1956～1961年五年间畸形胎儿6000～8000个。 药品安全性 什么是发育毒性？ 发育毒性（developmental toxicity）： 指出生前后接触有害因素，在子代个体发育为成体之前诱发的任何有害影响 发育毒性 主要表现 背景 理论 So 如何降低及避免发育毒性？ 1、发育生物体死亡：早早孕丢失、着床后发育到某一阶段死亡 2、生长改变：多指生长迟缓 3、结构异常：即畸形 4、功能缺陷：潜伏期较长 5、出生障碍：出生前即已形成的发育障碍，包括畸形及功能缺陷 6、不良妊娠结局：妊娠后不能产生外观和功能正常的子代 发育毒性评价实