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* 生活中我们最常提到的酵母是酿酒酵母(也称面包酵母),自从几千年前人类就用其发酵面包和酒类。 导入新课 有什么办法可以使酵母菌反复使用? 在日常生活中,我们无法将酵母菌反复使用。 专题4 酶的研究与应用 教学目标 知识与能力 1. 了解固定化酶在生产实践中的优点。 3. 掌握固定化酶或细胞的方法。 2. 掌握固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 4. 产是指被固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。 过程与方法 情感态度与价值观 通过实验与理论知识相结合的方法,在实验中掌握酵母细胞固定化的知识。 1. 培养学生动手实验能力。 2.培养在实验过程中的团结互助的精神。 教学重难点 课题重点 制备固定化酵母细胞。 课题难点 制备固定化酵母细胞。 内容解析 1. 基础知识 从酶到固定化酶再到固定化细胞的发展史 酶 存在问题: 容易失活 不能再次利用 产物中的酶影响产品质量 设想: 将酶固定在不溶于水的载体上 固定化酶出现 固定化酶 存在问题: 设想: 一种酶只能 催化一种化 学反应 生产实践中, 产物需要一系 列酶促反应得到 酶来自细胞, 能否将合成细胞的酶直接固定 固定化细胞出现 思考下面的问题 如何使酶或者细胞既能在反应过程中与反应物接触,又能在反应结束后与反应物分离? 包埋在网格中 用化学键结合起来 物理吸附在载体上 通常情况下,酶和细胞固定采用不同的方法 酶 物理吸附法 化学结合法 细胞 包埋法 2. 实验设计 今天我们以酵母细胞为实验材料,进行酵母细胞的固定化实验。 实验材料 干酵母 CaCl2溶液 海藻酸钠 干酵母 实验过程 (1)制备固定化酵母细胞 配置0.05mol/L的CaCl2溶液 CaCl2 0.83g 150mL H2O 配置海藻酸钠溶液 海藻酸钠 0.7g 10mL水 小火加热 配方 干酵母 取1g干酵母,放10mL水中, 用玻璃棒搅拌成糊状, 放置1h左右使其活化 干酵母活化 将已经活化的酵母细胞加 入到海藻酸钠溶液中 用玻璃棒进行充分搅拌, 使其混合均匀 固定化酵母细胞 将溶液转移至注射器中 将注射其中的溶液滴加 到配置好的CaCl2溶液中 液滴在CaCl2溶液中形成 凝胶珠 固定化酵母细胞 将这些凝胶珠在CaCl2 溶液中浸泡30min左右 固定化酵母细胞 (2)用固定化酵母细胞发酵 将凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次 将凝胶珠放入10%葡萄糖溶 液中,25℃发酵24h 3. 结果结果分析与评价 3.1 制备固定化酵母细胞结果分析 形成凝胶珠的颜色较深,形状为圆形或椭圆形 成 功 凝胶珠颜色过浅,呈白色 失 败 原因 固定的酵母细胞过少,海藻酸钠浓度偏低 凝胶珠不是椭圆形或圆形,呈其它形状 失败 原因 固定的酵母细胞过多,海藻酸钠浓度偏高 3.2 固定化酵母细胞发酵结果分析 葡萄糖溶液中产生许多气泡,同时闻到酒味 固定化酶技术高果糖浆生产中的应用 1. 将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上 2. 将酶颗粒装入到反应柱内,反应柱地段有筛孔,可以使反应溶液通过,而酶颗粒不能通过 4. 相关链接 3. 将葡萄糖溶液从反应柱上端注入 葡萄糖 葡萄糖异构酶 果糖 4. 果糖溶液从下端流出,葡萄糖异构酶仍保留在反应柱内 我们采取这种方法,成功地实现了酶与反应物的自由接触与分离。 课堂小结 固定化技术 固定化酶技术 固定化细胞技术 化学结合法 物理吸附法 包埋法 固定化酵母细胞的实验过程 酵母细胞的活化 配置物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 固定化酵母细胞 利用固定化酵母细胞发酵 1. (2009.江苏) 下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是( ) A. 固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显 B. 固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧 C. 利用固定化酶降解水体中有机磷农药,需提供适宜的营养条件?? D. 利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应物 高考链接 A 解析: 本题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识。 B选项固定化酶不像普通酶那样对环境要求那么高,耐受性比较好,和溶解氧没什么关系
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