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南蛇藤中扁蒴藤素提取分离工艺研究 作者：冯玉静，王定勇，陈铭祥 【摘要】 　　目的 对南蛇藤中扁蒴藤素提取纯化工艺进行研究。方法 南蛇藤根粉经丙酮冷浸提取后，采用聚酰胺柱层析及硅胶柱层析进行分离纯化；以HPLC法测定产品中扁蒴藤素的含量，并以其为指标对分离纯化的主要工艺参数进行优化。结果 将待分离的南蛇藤丙酮浸膏和聚酰胺(60～100目)按物料比0.02（质量比）装入层析柱中，常压下用体积分数75%的甲醇洗脱至洗脱液近无色，收集流分，浓缩后得到粗品，经硅胶柱层析进一步纯化，再经重结晶后纯度提高到98.0%以上。结论 该工艺简单、成本较低，适于工业化。 【关键词】 南蛇藤 扁蒴藤素 聚酰胺柱层析 硅胶柱层析 分离 纯化 　　Abstract:Objective To study the isolation and purification condition of pristimerin from Celastrus orbiculatus Thunb. Methods Pristimerin was isolated and purified by polyamide column chromatography and silica gel column chromatography, and the content of pristimerin was determined by HPLC. The main isolation factors were optimized. Results The optimum isolation conditions were as following: the weight ratio of sample to polymide was 0.02, 75% methanol was used for eluent. Under the conditions above, crude product was obtained, which was further purified by silica gel column chromatography and recrystallized. Finally, the purity reached to 98%. Conclusion This method is simple and economic, which could be used in industry. 　　Key words:Celastrus orbiculatus Thunb；pristimerin；polyamide column chromatography；silica gel column chromatography 　　南蛇藤Celastrus orbiculatus Thunb.系卫矛科南蛇藤属植物，又名过山风、苦树皮等。全草均可入药，有清热、祛风、除湿、活血、解毒等功效，常用于治疗风湿性关节炎、腰腿痛等症［1］。目前已从南蛇藤植物中分离得到60余种化合物，主要为β二氢沉香呋喃倍半萜多醇酯、生物碱、三萜类，此外还有黄酮类、有机酸类、多元醇类、甾体类及鞣质［2］。1996年,蒋毅［3］等从南蛇藤根皮中提取出橙红色结晶扁蒴藤素。 　　 　　扁蒴藤素是一种醌甲基三萜类化合物，具有广谱抗肿瘤［3,4］、抗炎［5］、抗氧化［6］等多种药理活性，主要存在于卫矛科和希藤科植物中。有研究发现，在给药初期的24 h内，非致瘤性的人类乳房上皮细胞菌株MCF10A对扁蒴藤素的抵制力是人乳腺癌细胞（MDAMB231）的2倍，表明扁蒴藤素对肿瘤细胞具有很好的选择性，可开发成为高选择性的抗肿瘤化疗药［7］。2008年,Yang等［8］发现扁蒴藤素为一种新的蛋白酶体抑制剂，使得扁蒴藤素成为抗肿瘤研究的热点。南蛇藤分布广泛，在我国东北、华北、华东、西北、西南及湖北、湖南、广东等均有分布，资源丰富，因此目前的研究常选择南蛇藤作为扁蒴藤素的来源植物。目前已有一项从粉背南蛇藤(Celastrus hypoleucus)中提取扁蒴藤素的工艺专利［9］，本文选择南蛇藤作为来源植物，采用聚酰胺柱层析和硅胶柱层析结合的双柱层析的方法得到高纯度的扁蒴藤素。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与试剂 　　 　　南蛇藤根皮采自广东阳春，扁蒴藤素对照品为实验室自制（经HPLC测定，纯度≥98%），甲醇（色谱纯，迪马公司），甲醇、石油醚、乙酸乙酯（分析纯，天津市富宇精细化工有限公司），水（自制超纯水/蒸馏水），聚酰胺（60～100目，浙江省台州市路桥四甲