生物：《基因工程》((新人教版选修3)汇总.ppt

7.天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题： ⑴将淀粉酶基因切割下来所用的工具是____________， 用___________将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子， 下一步将该DNA分子___________，以完成工程菌的构建。 ⑵若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检 测方法是____________；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成 淀粉酶，可采用___________________检测。 限制酶 DNA连接酶 导入酵母菌 DNA分子杂交 抗原一抗体杂交 8.利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术 2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目 通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本 低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗 原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用 生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答： ⑴在基因工程中，A表示????????????? ，如果直接从苏云金杆 菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点 是??????????? ，B表示????????????????? 。 目的基因? 重组DNA 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且在特定的位点上切割DNA分子? ⑵在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目 的基因，并采用____???? 技术对目的基因进行了扩增，然 后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组 载体的构建过程中需要的工具酶有___________________ ⑶基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基 因表达载体至少包括哪些部分?????????????? ??。 ⑷将目的基因导入受体细胞的过程中，在③过程中一般是 采用????????? ，在②过程中一般采用?????????????? ， 受体细胞一般是????????????????? 。 PCR 限制酶、DNA连接酶 目的基因、启动子、终止 子、标记基因 农杆菌转化法 显微注射技术 受精卵 ⑸由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法及结果是什么? ⑹要确定目的的基因（抗虫基因）导入棉花细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程： 从转基因羊的乳汁中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗 原—抗体杂交?如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原 蛋白；如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白. 让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以 确定其是否具有抗虫性状 基因工程专题复习 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。 1、来源： 2、作用： 3、结果： 形成两种末端 “分子手术刀” ——限制酶 黏性末端 平末端 G A A T T C G C T T A A A A T T C G 限制酶切割ＤＮＡ分子示意图 C T T A A G 思考 　　要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 两个切口，四个黏性末端。 黏性末端 黏性末端 什么叫平末端？ “分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶 １.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。 1.下图为DNA分子的切割和连接过程。 ⑴EcoRI是一种 酶，其识别序列是 ，切 割位点是 与 之间的 键。切割结果产 生 。 限制 GAATTC G A 磷酸二酯 黏性末端 ⑵不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶是 酶 此酶的作用是在 与 之间形成 键。 DNA连接 G A 磷酸二酯 两种DNA连接酶： E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶 ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来； 而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？ DNA连接酶 DNA聚合酶 连接DNA链 连接部位 相同点 双链 单链 在两DNA片段之间形 成磷酸二酯键 将单个核苷酸加 到已存在