结核病实验室诊断现状(04.10.17)课题.ppt

全国结核病实验室网络 国家结核病参比室 卫生部临检中心 省家结核病参比室 省级临检中心 地市实验室 县市实验室 县市医疗机构结核病实验室 省级医疗机构结核病实验室 地市医疗机构结核病实验室 MODS Microscopically observed drug susceptibility MODS显微镜下观察药物的敏感性 中盖项目试点地区 新诊断技术组合模式 镇江市 Hain组合方案： 县级采用LED+胸片+临床检查的方案进行诊断，并对涂阴患者做培养；地市级对涂阳的痰标本或涂阴培阳的菌株开展Hain耐药快速检测；经耐药快速检测诊断为利福平耐药的患者进一步开展二线抗结核药物传统药敏试验，检测其广泛耐药性。 宜昌市 Genechip组合方案： 县级采用LED+胸片+临床检查的方案进行诊断，并对涂阴患者做培养；地市级对涂阳的痰标本或涂阴培阳的菌株开展Genechip耐药快速检测；经耐药快速检测诊断为利福平耐药的患者进一步开展二线抗结核药物传统药敏试验，检测其广泛耐药性。 汉中市 Hain组合方案： 县级采用LED+胸片+临床检查的方案进行诊断；地市级对涂阳的痰标本开展Hain耐药快速检测；经耐药快速检测诊断为利福平耐药的患者进一步开展二线抗结核药物传统药敏试验，检测其广泛耐药性。 新型检测技术应用情况-3 关于Hain和基因芯片的建议 适用于地区及以上级实验室 仅适用于涂阳标本和结核分枝杆菌阳性培养物的检测 操作需要至少有3个独立的实验室以避免交叉污染 仅能检测MDR，XDR的检测仍需要依靠传统药敏试验 可以独立作为MDR的诊断工具 对于MDR病人，仍需要传统的培养（固体或液体培养）检测治疗效果（培养阴转） 临床报告必须取得省级临床检验中心颁发的《临床基因扩增实验室》许可证 建议的覆盖面: 每50－100万人口至少需要1个LPA实验室或基因芯片实验室，就我国目前实际情况100万人口地市的级建立一个相应实验室是可行的 Xpert MTB/RIF 检测结核分枝杆菌 检测利福平耐药 直接标本检测 100分钟可获得结果 WHO关于Xpert MTB/RIF的建议 Xpert MTB/RIF 应该用于怀疑MDR-TB的病人、以及HIV合并结核的病人的最初诊断（强烈推荐） Xpert MTB/RIF 在MDR或HIV问题不十分严重的地区，可以考虑作为显微镜检查基础之上的后续检测，特别是用于涂阴标本的进一步检测（根据具体情况推荐，需考虑当地的资源） 说 明 WHO在“201 1年全球结核病控制报告”中对该试剂的评估结论为：单次XpertMTB／RIF检测可检出99％的涂片阳性(简称涂阳)和80％的涂片阴性(简称涂阴)肺结核病患者。但有文献报道，单次XpertMTB／RIF检测涂阴培阳样本的检出率分别为72．5％和76．9％。由于涂阴患者包括涂阴培阳、涂阴和培养阴性(简称培阴)两种类型，而涂阴培阴患者的检出率必然低于涂阴培阳患者，因此，该报告中XpeftMTB／RIF的MTB涂片阴性患者阳性检出率较实际值偏高 说 明 涂阴特别是涂阴培阴患者的诊断有进一步探讨的必要，根据该检测试剂公开发表的数据，该试剂的敏感度研究均以培养或涂片阳性作为判断标准。涂阳培阳样本检出率为99．8％，培阳样本的检出率也高达90％，具有高敏感度。根据我国第5次结核病流行病学调查结果，以我国痰菌阳性(简称菌阳)患者占患者总数26．4％进行推算，该试剂的理论检出率仅为23．7％；我国结核病涂阴培阴患者占患者总数的73．6％ 说 明 Xpert MTB/RIF适用于痰标本（包括去污染后的痰标本），肺外标本应用 Xpert MTB/RIF 的研究十分有限。 增加检测次数可能会增加Xpert MTB/RIF的敏感性，但是需要考虑资源情况 上述建议也适用于儿童 不能取代传统的涂片检查、培养和药敏试验（治疗监测、流行病学调查、其他一线药物以及二线药物的药敏试验） 在MDR低风险组（如新病人）Xpert MTB/RIF检测结果为利福平耐药者，建议用传统药敏试验或LPA进行确认 新检测技术验证评估与应用 完成评估 国产环介导核酸等温扩增试剂盒 新型检测检术应用情况-4 其他正在开发或评估的新技术 方法 商品 检测目的 流体芯片法 MDR-TB检测 荧光定量PCR溶解曲线法 检测MDR-TB/XDR-TB MODS（显微镜观察药敏实验） 无商品化试剂盒 检测分枝杆菌的药物敏感性 噬菌体生物扩增法 诊断结核感染及药物敏感性 新的固体药敏方法 硝酸盐还原试验（无商品化试剂盒） 诊断菌株对异烟肼和利福平的敏感性 薄层琼脂培养法（无商品化试剂盒） 诊断结核感染以及对异烟肼和利福平的敏感性 颜色指示方法 刃天青法（无商品化试剂盒） 检测菌株对利