2色谱分析概论.pptVIP

第16章 色谱分析法概论 Chromatography 有机化学实验：薄层色谱、纸色谱 分析化学实验：气相色谱、高效液相色谱 概 述 固定相（stationary phase） 流动相（mobile phase） 色谱分离原理：利用物质在固定相与流动相之间的分配系数差异而实现分离。 色谱法与光谱法的主要区别： 色谱法具有分离、分析两种功能  色谱过程 吸附－解吸－吸附－解吸－ … 差速迁移 1、按流动相与固定相的分子聚集状态分类: 第一节 色谱法的分类 GC/LC GSC/GLC，LSC/LLC 柱色谱法,平面色谱法,毛细管电泳法 吸附、分配、离子交换、空间排阻色谱法 2、按固定相的形式： 3、按分离过程原理： 二、色谱流出曲线和有关概念 基线 （1）在一定色谱条件下，仅有流动相通过检测器系统时所产生的信号的曲线。 （2）实验条件稳定时，基线应是一条平行于横轴的线 （3）基线反映仪器的噪声随时间的变化  色谱峰 正态分布曲线 拖尾峰、前延峰 对称因子、拖尾因子 0.95～1.05 （一） 色谱流出曲线和色谱峰 保留时间 tR 时间 死时间 t0 调整保留时间 tR`= tR-t0 （二） 保留值：色谱定性参数 从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的 时间间隔 不被固定相滞留的组分从进样开始、通过色谱柱，到出现最大值所需要的时间，亦即流动相到达检测器所需的时间 某组分由于和固定相作用，比不作用的组分在柱中多停留的时间 （二）保留值：色谱定性参数 体积 保留体积 VR＝tR·Fc 死体积V0＝t0·Fc 调整保留体积 VR`=VR-V0 相对保留值 （三）色谱峰高和峰面积－定量参数 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离 峰 高 峰面积 色谱曲线与基线间包围的面积 （四）色谱峰区域宽度－柱效参数 （1）标准差σ （2）峰宽W （3）半峰宽W1/2 （五）分离度 分离完全条件：R≥1.5  三、分配系数和色谱分离 分配系数 容量因子 （二） 分配系数和保留因子与保留时间的关系 （1）分配系数或容量因子不等是分离的前提 （2）k值与组分、固定相和流动相的性质及温度、压力等有关，反应组分和固定相、流动相分子间作用力的大小 （3）k值大的组分在柱中停留时间长，较迟流出色谱柱 在某一液相色谱柱上组分A流出需15.0min，组分B流出需25.0min，而不溶于固定相的物质C流出需2.0min。问：(1)B组分相对于A的相对保留值是多少？(2)组分A在柱中的容量因子是多少？(3)组分B在固定相中的时间是多少？ 练 习 1. 色谱法作为分析方法的最大优点是： A 进行定性分析 B 进行定量分析 C 分离混合物 D 分离混合物并分析之 练 习 2. 衡量色谱柱效能的参数为（ ）。 A 分离度 B 容量因子 C 半峰宽 D 分配系数 练 习 3. 在色谱中，定量的参数是： A 保留时间 B 相对保留值 C 峰面积 D 调整保留值 ? 4. 在色谱中，定性的参数是： A 保留值 B 峰高 C 峰面积 D 半峰宽 练 习 5 在气相色谱中，直接表征组分在固定相中停留时间长短的保留参数是： A 保留时间 B 调整保留时间 C 死时间 D 相对保留值 E保留指数 练 习 6 气－液色谱中，下列哪一个对溶质的保留体积几乎没有影响： A增加固定液的量 B增加柱温 C增加柱长 D改变载气流速 一、分配色谱法 分配色谱法利用被分离组分在固定相和流动相中的溶解度差别而实现分离，包括GLC、LLC。 固定相：液体（固定液） 吸附色谱法 吸附色谱法利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别而实现分离。 固定相：吸附剂 离子交换色谱法 离子交换色谱法利用被分离组分离子交换能力的差别而实现分离。 固定相：离子交换树脂 分子排阻色谱法 空间排阻色谱法，也称分子排阻色谱法，利用被分离组分分子的线团尺寸而进行分离。 固定相： 多孔性凝胶 凝胶色谱法 分离只取决于凝胶的孔径大小与