色谱组基础知识培训分析报告.pptx

中检集团理化检测有限公司 CCIC PHYSICALCHEMICAL;目 录;前处理--索式提取Soxhlet Extraction ;前处理--超声提取Ultrasonic Extraction;前处理--微波提取Microwave Extraction;前处理--其他;仪器分析--色谱分析理论基础;2、色谱分离基本原理： 组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附或溶解、挥发的过程叫做分配。色谱法是利用不同物质在流动相和固定相两相间的分配系数不同，当两相做相对运动时，试验中各组分就在两相中经过反复多次的分配，从而使原来分配系数仅有微小差异的各组分能够彼此分离。;4、色谱柱效能 色谱柱的分离效能常根据一对难分离组分的分离情况来判断。如下图所示，左边的图两个峰严重重叠，分离不完全；右边的图两个峰间有一定距离，分离完全。可见要使两组分分离，两组分的保留值要有足够的差别，而且要求峰形较窄。 组分保留值的大小由组分在两相中的分配系数决定，受色谱过程的热力学因素控制，而色谱峰的宽窄则由色谱过程的动力学因素控制。;仪器分析--色谱分析理论基础;仪器分析--色谱分析理论基础;（1）归一化法 当试样中所有组分都能够流出色谱柱，且在色谱图上都显示色谱峰时，可用此法计算其组分含量。;（2）外标法 外标法是以待测成分的对照品作为对照物质，相对比较以求得供试品含量。外标法在操作上可分为校正曲线法和校正因子求算法。;（3）内标法 当试样中所有的组分不能全部出峰，或者试样中各组分含量差异很大，或仅需测定其中某个或某几个组分时，可用此法。;仪器分析--气相色谱仪(GC);仪器分析--气相色谱仪(GC);仪器分析--气相色谱仪(GC); 符号;5、气相色谱操作条件的选择 （1）载气的选择：一般为惰性、干燥、纯净的气体，并考虑检测器的种类，TCD常用He（或H2），FID常用N2，GC常用N2，GC-MS联用时常用He。 （2）柱温的选择：柱温的选择应使难分离的两组分达到预期的分离效果，一般柱温应比试样中各组分的平均沸点低20~30℃；对于沸点范围较宽的试样，宜采用程序升温。 （3）进样量和进样时间：进样量太少会导致无法检出、太多会导致色谱峰重叠，液体进样约在0.1μL~5μL，气体进样约在0.1ml~10ml。为防止影响分离效果，进样速度必须快，一般在1秒内完成。 （4）气化温度的选择：气化温度一般较柱温高30~70℃，与试样的平均沸点相近，但气化温度也不宜过高，以防试样分解。;仪器分析--气质联用仪(GC-MS); 上图为苯酚的电子轰击质谱图，谱图的纵坐标为离子相对强度（丰度），横坐标是离子的质荷比。有机分子经电子轰击后，将产生多种离子，其中最重要的是分子离子、同位素离子和碎片离子，它们的质荷比及相对强度可提供有机物丰富的结构信息。;1、分子离子 分子失去一个价电子后生成的正离子成为分子离子。分子离子是质谱图中最重要的离子，因为：（1）它的质荷比就等于化合物的相对分子质量；（2）它的相对强度表明分子的稳定程度，由此可推测化合物的类型；（3）谱图中所有碎片离子都是由分子离子直接或间接碎裂产生的。 2、同位素离子 组成有机化合物的常见元素中，除了个别元素外，基本都有一个以上的稳定的同位素，它们的相对丰度是恒定的。根据分子离子和它的同位素离子质量和相对强度可以推测有机物中含有元素的种类和原子个数。 3、碎片离子 有机分子被高能电子轰击碎裂后产生的带正电的碎片叫碎片离子。每一个有机分子都有独特的、可以重复的碎裂方式，不同的分子得到不同的质荷比和相对强度的碎片离子，所以可以把它们区别开。;仪器分析--气质联用仪(GC-MS);仪器分析--气质联用仪(GC-MS);1、高效液相色谱法的特点和应用 高效液相色谱法是以液体为流动相的色谱分析法，它在经典色谱理论的基础上，采用了高压泵、化学键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等实验技术建立的一种液相色谱分析法。适用于溶解后能制成溶液的样品(包括有机介质溶液)，不受样品挥发性和热稳定性的限制，对分子量大、难气化、热稳定性差的样品及高分子和离子型样品均可检测，用途广泛，可分析80%的有机化合物。;仪器分析--高效液相色谱仪(HPLC);4、固定相 用来制备键合固定相的载体，几乎都是用硅胶。利用硅胶表面的硅醇基(Si-0H)与有机官能团可成键，即可得到各种性能的固定相。 疏水基团 如不同链长的烷烃（C8和C18）和苯基等 极性基团 如氨丙基，氰乙基、醚和醇等 ;仪器分析--高效液相色谱仪(HPLC);仪器分析--高效液相色谱仪(HPLC);仪器分析