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第2章 紫外－可见分光光度法 Ultraviolet and Visible Absorption Spectroscopy 学习目标 1. 掌握紫外-可见分光光度法的原理； 2. 熟悉紫外-可见分光光度计的结构及各部分作用，了解不同类型分光光度计的结构； 3. 了解紫外-可见分光光度法实验条件的选择； 4. 掌握紫外-可见分光光度计的定性定量方法。 引言：什么是紫外-可见分光光度法？ 2.1.1 紫外-可见分光光度法的特点 2.1.2 光的基本性质 各种电磁波依其波长的不同，分别属于下列光谱区间： γ 射线： 0.001～0.01nm ； X 射线： 0.01～10nm ； 紫外光： 10～380（400）nm； 可见光： 400～780nm ； 红外线： 0.78（800）～1000 μm； 微波： 0.1～10cm ； 射频： 10cm 以上。 单色光：最初指具有同一波长（单一颜色）的光。 现指波长范围很窄的光。光的波长范围越窄，其单色性就越好。 复合光：由不同波长的光组合而成的波长范围较宽光。如白光 2.1.3 物质对光的选择性吸收 （1）光色的互补关系 可见光的波长范围： 400～780 nm。 太阳光、白炽灯光的波长是多少呢？ 实验表明，太阳光等“白光”可以分解成红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色的光。 将红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色的光按一定比例混合，就能得到白光。 进一步研究表明，两种适当颜色的光以一定比例相混合，也能够得到白光。这两种色光就叫做互补色光。 （2）物质的颜色（P65） 世界上的物质为什么会有各种各样的颜色呢？ CuSO2 溶液： KMnO4 溶液： K2CrO4 溶液： 物质呈现不同的颜色，是由于它对光的选择性吸收的结果，显示出的颜色是它吸收的颜色的互补色。 不同颜色的可见光具有不同的波长 （3）物质对光的选择性吸收的实质 1.2.4 吸收曲线 （Absorption Curves） （P65） 用不同波长的单色光照射试样，测量其对应的吸光度值，可得到反映试样物质对不同波长的光的吸收特性的曲线——吸收曲线（吸收光谱）。 （3）在λmax处测定，吸光度最大，灵敏度最高。通常选择λmax作为定量分析中的入射光波长。 （4）不同物质的吸收曲线的形状不同。 （5）吸收曲线能提供物质的结构信息，可以作为物质定性分析的依据，是物质的重要基本特性之一。 （4）描述入射光透过溶液的程度: 透光度 T (透射比) 2.2.4 吸光度的加和性 对于多组分共存体系，若各组分浓度很低，可忽略相互影响，则有： A总 ＝ A1 ＋ A2 ＋ A3 ＋ … ＋ An ＝ε1bc1 ＋ ε2bc 2＋ ε3bc 3＋ … ＋ εnbc n 这叫做吸光度的加和性。 2.2.5 偏离比耳定律的原因  （一）非单色光引起的偏离 （二）浓度过高引起的偏离 比耳定律成立的条件之一：所有的吸光粒子相互独立，不发生相互作用。 只有在稀溶液 ( c 10－2 mol / L ) 中，吸光粒子之间相距较远，才基本符合上述条件。 当溶液浓度 c 10 －2 mol / L 时， 吸光粒子之间距离缩短，其电荷分布相互影响加强，引起吸光行为的变化，使吸光能力减弱，导致标准曲线向下弯曲。 同时，浓度很高时仪器对吸光度测定的误差增大。 故：朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。 (三) 化学性因素引起的偏离 例如 1.指出下列哪种是紫外-可见分光光度计常用的光源？ ( ) 2. 在一定波长处，用2.0 cm吸收池测得某样品溶液的百分比透光率为71%，若改用3.0 cm吸收池时，该溶液的吸光度A为（ ） 3.常见紫外-可见发光光度计的波长范围为（ ） 4. 在分光光度法中，运用朗伯－比尔定律进行定量分析采用的入射光为（ ） 5. 符合朗伯-比尔定律的有色溶液稀释时，其最大吸收峰的波长位置 （ ） 6.在符合朗伯特-比尔定律的范围内，溶液的浓度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是（ ） 7.常用作光度计中获得单色光的组件是（ ） 8. 某药物的摩尔吸光系数（