细胞生物学期末论述.doc

第一章 绪论 细胞生物学是研究和揭示细胞基本生命活动规律的科学，从显微、亚显微与分子水平三个层次上研究其重大生命过程。 细胞生物学的主要研究内容： ①细胞的形态、结构和功能②细胞的生命活动规律③细胞的应用和起源 细胞生物学的发展简史： 第一个发现细胞的是英国学者胡克(Rorbert Hooke)。 施来登和施旺 1838~1839年 细胞学说 孟德尔 摩尔根 遗传 第二章 细胞的统一性与多样性 细胞是生命活动的基本单位？ ①除病毒外，其他一切有机体都由细胞构成，细胞是构成有机体的基本单位 ②细胞具有独立的、有序的自控代谢体系，细胞是代谢与功能的基本单位 ③细胞是有机体生长与发育的基础 ④细胞是繁殖的基本单位，细胞具有遗传的全能性 ⑤没有完整的细胞就没有完整的生命 细胞的基本共性 1.具有相似的化学组成 基本元素→无机物和有机物 2. 均有细胞膜 脂-蛋白体系 3. 均有有控制遗传的装置-DNA和RNA 4. 细胞有核糖体 细胞功能的体现者是蛋白质(包括酶)，蛋白质是在核糖体上合成的。 5.以一分为二的分裂方式进行增殖 动、植物细胞、细菌细胞都是如此。 原核细胞的三个代表：支原体、细菌和蓝藻 支原体（mycoplast）是目前发现的最小最简单的细胞？ 一个细胞体积的最小极限直径为140~200nm，而现在发现的最小支原体细胞的直径已接近这个极限。因此，比支原体更小更简单的结构，似乎不可能满足生命活动的基本要求，也就是说支原体应该是最小最简单的细胞。 细菌和蓝藻结构比较 细菌的结构与特点 ■核区与基因组 拟核 ■表面结构 细胞质膜 又称细胞膜，具有多功能性（能够代替部分细胞器的功能） 中膜体、细胞壁、荚膜、鞭毛 ■核糖体 ■核外DNA分子——质粒，具有自主复制功能，并能自发与核DNA结合，作为基因转移的 载体运用到基因工程中 ■内生孢子 蓝藻的结构及特点 ■中心质（原核或原始核） ■类囊体： 同心环样膜片层结构，上有藻胆蛋白体，由几种藻胆蛋白构成。 只含叶绿素a无叶绿素b ■表面结构 ：细胞壁、胶质鞘 ■细胞分裂 ■异形胞 细胞出现了分化 真核细胞的基本结构体系 生物膜系统2、遗传信息传递与表达系统3、细胞骨架系统 真核与原核细胞的根本区别 细胞膜系统的分化和演变（细胞膜系统复杂化） 2.遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化（遗传装置复杂化） 病毒 彻底的寄生性，所以在进化与起源上来看先有细胞 细胞生物学研究方法 细胞形态结构的观察方法 细胞组分的分析方法 细胞培养、细胞工程与显微操作技术 光学显微镜技术 普通复式光学显微镜、相差显微镜、激光扫描共焦显微镜（LSCM） 电子显微镜技术 电子显微镜的基本构造（电子束照明系统、成像系统、真空系统、记录系统） 主要电镜制样技术 超薄切片技术（1）固定 固定剂为戊二醛和四氧化锇（2）包埋 包埋剂为环氧树脂 （3）切片 玻璃刀（4）染色 电镜样品用重金属盐进行染色 2.负染色技术 背景染色，样品不染色 3.冷冻蚀刻技术 冰冻断裂与蚀刻复型 4.扫描电镜（SEM） 扫描隧道显微镜（STM）原理：量子力学中的隧道效应 细胞及其组分的分析方法 离心分离技术 差速离心、密度梯度离心 细胞成分的细胞化学显示方法 显色剂与所检测物质中一些特殊基团特异性结合 特异蛋白抗原的定位与定性 （1）免疫荧光技术：荧光抗体的制备、标本的处理、免疫染色、观察记录。 （2）免疫电镜技术：①免疫铁蛋白技术②免疫酶标技术③免疫胶体金技术 细胞内特异核酸的定位与定性 原位杂交技术：用标记的核酸探针通过分子杂交确定特异核苷酸序列在染色体上或在细胞 中的位置的方法称为原位杂交。 定量细胞化学分析技术 流式细胞仪 细胞培养 动物细胞培养类型：原代培养细胞、继代培养细胞 细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。 细胞系：原代培养物成功传代后，则称之为细胞系。 植物细胞培养类型：原生质体培养 （体细胞培养）、单倍体细胞培养（花药培养） 细胞工程 细胞融合与细胞杂交技术?单克隆抗体技术 通过培养和诱导，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合（cell fusion）或细胞杂交（cell hybridization） 细胞及生物大分子的动态变化 荧光漂白恢复技术：用来检测活细胞表面活细胞内部生物大分子的运动及速度 荧光标记→荧光淬灭（漂白）→荧光恢复 放射自显影技术 原理及应用： ?利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究； ?实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。 前体物掺入细胞（标记：持续