第二章电生理方法2012.9.18.概述.ppt

Hermann 变质学说(Alteration theory)。 1879年，他指出，在损伤的神经或肌肉中所出现的负电位差，是发生于损伤一端的，后来进一步证明了完全死亡的组织上是不产生这种负电位差的。这种正常部位与损伤部位之间的电位差，称为损伤电位 (injury potential) 这种电流则相应地称为损伤电流（injury current）Hermann认为，这种电流是损伤时才产生的。因此当组织损伤时，在生理和化学作用的影响下产生了局部的变质，因此与正常部位之间产生了电位差。 Bernstein膜学说 1902年，Bernstein提出生物电发生的膜学说： “神经或肌肉的细胞膜只对钾离子有特殊的通透性，而对较大的阳离子和阴离子则均无通透性，因此由于细胞内外钾离子分布不均匀，在膜两侧就形成一个电位差，此即静息电位，神经冲动到来时，膜变为无选择通透的膜，静息电位消失，动作电位因而产生。” Hodgkin和Huxley离子学说（动作电位的钠学说） 1940年前后，由于Hodgkin和Huxley在枪乌贼巨轴突上发现动作电位大于静息电位的事实，膜两侧溶液成分不同；膜对离子具有选择性通透性，这种通透性在动作电位时发生改变。静息时，对K+通透，兴奋对 Na+ 通透超过 K+，通透性变化说明了神经的电兴奋，产生了离子学说（钠学说）。 第二节：电压钳制技术 (Voltage clamp technique) 利用微电极技术，虽然记录到细胞内的电变化过程，但不能阐明这种变化的原因。要阐明跨膜电变化机制，必需应用电压钳制技术。这一技术首先是由Cole及其同事设计，在经Hodgkin等人加以改进，用于神经电生理研究，弄清了神经纤维在兴奋时离子流的情况。 一、细胞膜的生物物理特性 (Biophysical properties of cell membrane) 细胞膜主要由脂质和蛋白质构成。以脂质双分子层为支架，镶嵌着不同特性的蛋白质颗粒。细胞膜的电紧张及其扩布规律，膜的极化状态及其形成过程中等都是细胞膜电缆性质(cable properties)的反映。(轴浆电阻与膜电阻、膜电容的组合，使电流对膜电位的影响起着依距离而衰减以及在时间上的延缓作用――神经的“电缆”性质)。细胞膜的电缆特性从定的等效电路及其时间常数和空间常数得到证实。 * 第二章 心肌电生理学研究方法 Methodology of Myocardium Electrophysiological Research 电生理学技术的发展 1825年 电流计发明与应用 1922年 电子管放大器和阴极射线示波器问世 20世纪40年代 微电极技术产生 动作电位的钠学说 20世纪50年代 电压钳技术产生 20世纪70年代 膜片钳技术 谢灵顿 ( Sherrington) （1857-1952） 英国神经生物学家。 发现中枢神经反射活动规律 艾德里安 (Adrian ) （1889-1977） 英国生理学家。 阐明动作电位及其传导规律 1932年获诺贝尔奖 厄兰格 (Erlanger) （1874-1965） （美） 两人合作发明了阴极示波器，并研究了神经纤维的功能 加塞 (Gasser ) （1888-1963） （美） 1944年获诺贝尔奖 Eccles 1976年德国马普生物物理化学研究所Neher和Sakmann首次 在青蛙肌细胞上用双电极钳制膜电位的同时，记录到乙酰胆碱（Acetylcholine, ACh）激活的单通道离子电流，从而产生了膜片钳技术（patch clamp technique）； 1980年Sigworth等获得10-100GΩ的高阻封接（Gigaseal），1981年Hamill和Neher等对该技术进行了改进，引进了全细胞记录技术，从而使该技术更趋完善； 1983年10月，《Single-Channel Recording》一书的问世，奠定了膜片钳技术的里程碑。 Neher Sakmann （1944-） （1942-） （德国细胞生理学家） （德国细胞生理学家） 合作发明了膜片钳技术，并应用这一技术首次证实了细胞膜存在离子通道。这一成果对于研究细胞功能的调控至