第章光光度法说课.ppt

例12-1 已知某化合物的相对分子质量为251，将此化合物用乙醇作溶剂配成浓度为0.150mmol·L-1的溶液，在480nm波长处用2.00cm吸收池测得透光率为39.8％，求此化合物在上述条件下的摩尔吸光系数ε和吸光系数a。 解： 　　8.3.3 偏离Beer Laws的因素 c A 　(3)介质不均匀引起的偏离 　(1) 比尔定律的局限性： 比尔定律只适用于稀溶液 　（2）化学因素引起的偏离 　　(4) 非单色光引起的偏离 　（2）化学因素引起的偏离 　溶液中的副反应发生而引起的 反应条件影响显色反应 [例] Cr2O72-+H2O=2HCrO4-=2H++2CrO42- 橙色 黄色 λ1max=350nm 　　　 λmax=375nm λ2max=450nm 　　等吸收点：λ335 和λ445的曲线相交处 此点两吸收物质的吸光度相等 　　(4) 非单色光引起的偏离 　　因物质对不同波长的光的吸收程度不同，而导致偏离 △A 1=A 1-A 2 △A 2=A 3-A 4 △A 1 △A 2 直线偏向 c 轴 　所以：Beer’s Law 应在一 定的浓度范围内使用 ?1 ≠ ? 2 ≠ ? 3 A ≠εbc A不与 c成线性关系 ? A ?2 ?1 ?3 A1 A2 A3 A4 8.4 吸光光度分析法及仪器 　　8.4.1 目视比色法 　　1.用同质材料的比色管 　　2.配制不同浓度的标准溶液 　　3.相同的实验条件下，配成一套标准色阶 　　4.待测物与标准色阶的配制条件相同，置于色阶中比较颜色度 优点: 仪器、操作简单，成本低，无需单色光 缺点: 准确度低，主观误差较大 　　8.4.2 吸光光度法： 　　光电比色法 (光电比色计) 吸光光度法 (分光光度计) 　　(1) 吸光光度法的特点： 灵敏度高:检测下限可达10-5~10-6molL-1 准确度高:分析误差2%~5% 应用广泛 仪器简单,操作简便快捷 (2)测定方法： 标准曲线法： 配制一系列已知准确浓度的标准溶液，测量一系列标准溶液的吸光度 c1 c2 c3 c4 c5 c6 c7 c8 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 绘制吸光度—浓度曲线即标准曲线 标准曲线的绘制 图12-6 维生素B12的标准曲线 ρ/（mg·L-1) 20 60 100 120 160 0.4 1.0 0.8 0.2 0.6 λ=550nm Ax ρx A （2）比较法 标准溶液： cs As 待测溶液： cx Ax 且有：As = εbcs 且有：Ax = εbcx 　　8.4.3 分光光度计 平行光 光源 单色器 吸收池 检测器 信号处理及显示器 ? ? ? ? 1、光源(light source) 热光源(如钨丝灯及碘钨灯)和气体放电光源(如氢灯或氘灯) 2、单色器(monochromator) 色散元件： 三角棱镜和光栅 3、吸收池(absorption cell) 比色皿：有普通玻璃和石英玻璃 4、检测器(detector) 有硒光电池光电管或光电倍增管 5、指示器(indicator) 有光点检流计、微电流计、数字显示器等 白光 紫 蓝 红 反射面 准直镜 入光狭缝 出光狭缝 (a) (b) 72系列分光光度计结构 * * * * * * * 8 吸光光度分析法 吸光光度法 spectrophotometry 吸光光度法的基本原理 光吸收基本定律—朗伯-比尔定律 吸光光度分析法及仪器 显色反应及显色条件选择 吸光光度法测量误差及测量条件的选择 吸光光度法的应用 8.1 吸光光度法(光谱分析法) 它是基于物质对光的选择性吸收的特征和对光的吸收程度而对物质进行的定性和定量分析的一种分析方法。 光分析法 光谱法 非光谱法 吸光光度法 可见吸光光度法：400～780nm 紫外吸光光度法：10～400nm 红外吸光光度法 0.78～1000μm 吸光光度法按所用的光源分类： 分光光度法的特点： 1.灵敏度高：能测1.0%----PPb级，微量级痕量组分； 3.操作简便、快速，应用广泛 2.准确度高：相对误差RE在2%~5% 　许多物质具有颜色，还