ABSCIEX_QTRAP_2111_ZGP讲课.ppt

液质联用系统的常见部件 LC/MS中的液相色谱 LC/MS中的质谱 Mass Spectrometry-质谱 质量是物质固有特征之一，不同的物质有不同的质量谱 分析物被转化为气相离子而被分析 这些离子按其质荷比 (m/z)被分离而被检测 质谱图即是相关的离子流对m/z的图 大气压电离技术 电喷雾电离技术(ESI) 大气压化学电离技术(APCI) 从LC 到 MS 的转变 物态转变: 液态 - 气态 带电状态: “中性” - 离子 真空变化: 760 torr - 10-5 to 10-8 torr 大气压电离 (API) 技术 ESI 和APCI 共同点: 使用高电压元件和充气喷雾法产生气相离子 通常产生 (M+H)+ 或 (M-H)- 等准分子离子 产生极少的碎片，但可以控制产生结构碎片 非常灵敏的技术 大气压电离 (API) 技术 一般而言,ESI 和 APCI 不同点: 生成离子方式不同 ESI - 液相离子化 APCI - 气相离子化 样品兼容性 ESI - 极性化合物和生物大分子 APCI - 非极性, 小分子化合物 (相对于用 ESI电离的化合物而言) 且有一定的挥发性 流速兼容性 ESI - 0.001 到 1 mL/min APCI - 0.2 到 2 mL/min 电喷雾离子源 电喷雾离子化分为三个过程: 形成带电小液滴 溶剂蒸发和小液滴碎裂 最终形成气相离子 电喷雾离子源2.溶剂蒸发和小液滴碎裂 电喷雾离子源3. 形成气相离子 ‘离子蒸发模式 影响化合物 ESI电离的因素 化合物的浓度 基质的性质 流速 ESI:样品浓度对其响应的影响 ESI:样品浓度对其响应的影响 信号的饱和归因于离子在液滴表面过于密集,致使某些样品离子不能到达液滴表面. ESI:基质对样品响应的影响 一般而言,样品信号强度响应随着其它电解质浓度的增高而降低. 这一现象叫作‘离子抑制.’ 样品离子和电解质离子对电荷及占据液滴表面的竞争导致离子抑制. 电喷雾的基质效应 电喷雾的基质效应 电喷雾的基质效应 基质效应的定义 1. 绝对基质效应相同浓度的目标物溶在纯溶剂（如乙腈）和含有基质的提取液中时其质谱信号响应不同 离子抑制现象:这种现象最常见离子增强现象:有时也会出现离子增强现象。例如 如标准溶液是含多个目标物的混合标准溶液，而样品提取物中只有一个目标物 2. 相对基质效应在多种相同种类基质中基质效应的不同响应 ：如：多种不同种类苹果基质中目标物的不同响应 避免基质效应的法规要求 (EU) 避免基质效应的法规要求(US) 避免基质效应的典型策略 减少取样量 更好的前处理方法 提高色谱分离度 稀释最后的定容提取液 减少样品的进样体积 补偿 定量校正曲线用空白基质提取液配制浓度点 用同位素内标法进行定量 标准品添加技术 ESI的特征 低分子量化合物一般产生单电荷离子(失去或得到一个质子) 高分子量生物大分子和聚合物产生多电荷离子 几乎没有碎片离子 可能生成加合物和/或多聚体;常见的是溶剂加合物和NH4+(M+18), Na+(M+23),和K+(M+39) 加合物 灵敏度取决于化合物本身和基质 大气压化学电离 (APCI) APCI1. 快速蒸发 APCI 2. 气相化学电离 与各种液相系统匹配能力 实验数据 流动相中使用磷酸盐缓冲盐并不影响灵敏度 数字式的检测器：脉冲离子计数器 仪器的重现性和稳定性（胆固醇氧化产物浓度为5ppb）CV%=0.34(n=6) 耐用性和重现性 AB SCIEX QTRAP串联四极杆线性离子阱质谱 六种增强型扫描方式 增强分辨扫描 (ER) 增强子离子扫描 (EPI) MS/MS/MS (MS3) 增强全扫描(EMS) 增强多电荷扫描(EMC) 时间延迟碎片扫描 (TDF) Q TRAP 液质联用系统 定量和定性一次完成…MRM?Enhanced Product Ion (EPI)实验 MRM-IDA-EPI扫描方式同时定量定性分析 QTRAP技术的应用实例 氟喹诺酮类兽药残留的分析 分析条件 质谱条件： 质谱仪：ABSCIEX公司API 3200QTRAP系统 电离方式：ESI+ 采集方式：MRM-IDA-EPI(同时定量定性分析） 仪器参数： Curtain gas=10, Collision gas= 5, Ionspray Voltage=5500, Temperature=600, Ion Source gas1=60, Ion Source gas2=50, Interface Heater=on, Entaance Potential=10,