一轮——生化总结.docVIP

第一节 蛋白质 一、蛋白质含量的测定 凯氏定氮法——蛋白质中氮含量约为 ，即1克氮所代表的蛋白质约为 克。 二、氨基酸的结构 蛋白质的水解产物为 α 氨基酸（除 脯 氨酸） 除 甘 氨酸，氨基酸都有不对称碳原子，分为D—型、L—型，天然蛋白质中的氨基酸为 L 型。 甘氨酸 丝氨酸 糖基化 苏氨酸 酪氨酸 甲状腺激素 天冬酰胺 半胱氨酸 谷氨酸 天冬氨酸 赖氨酸 精氨酸 组氨酸 甲硫氨酸 乙烯 色氨酸 生长素 三、氨基酸的性质 1、氨基酸的两性离子形式 2、氨基酸的等电点（pI）及计算 3、氨基酸的存在形式 溶液pH等于等电点时， ； 溶液pH小于等电点时， ； 溶液pH大于等电点时， 。 四、蛋白质的结构 1、N端、C端 书写习惯： 左端N端，右端C端 2、 空间结构（构象） 一级结构 二级结构 三级结构 四级结构 化学键 肽键 氢键 疏水键 3、二级结构类型： （1）α螺旋 每 3.6 个氨基酸上升一圈，每圈高度为 0.54nm . 链内氢键 （2）β折叠 平行、反向平行 链间氢键 （3）β转角 （4）无规卷曲 五、蛋白质的分类 1、根据分子形状 球状蛋白质：易溶解 纤维状蛋白质：不溶于水 2、根据组成 单纯蛋白质 缀合（结合）蛋白质：色蛋白、糖蛋白、核蛋白、脂蛋白、磷蛋白 六、蛋白质胶体性质 原因 半透膜透析 七、酸碱性质 等电点 电泳 八、蛋白质沉淀 非变性沉淀 变性沉淀 九、蛋白质的分离、纯化 1、透析法 根据蛋白质分子大小 2、凝胶过滤 根据蛋白质分子大小 大分子选被洗脱出来，小分子后被洗脱出来 3、等电点沉淀法 根据溶解度差别 4、盐析法 根据溶解度差别 5、有机溶剂沉淀法 根据溶解度差别 6、电泳法 如聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 根据电荷、大小不同 7、离子交换层析： 根据电荷不同 纤维素离子交换剂 阳离子交换：羧甲基纤维素（CM—纤维素） 阴离子交换：二乙氨乙基纤维素（DEAE—纤维素） 8、亲和层析 蛋白质与特异的配体相结合 抗原—抗体 激素—受体 酶—底物 酶—抑制剂 十、特异蛋白质的定位 1、免疫荧光技术 原理：抗原—抗体特异性结合、荧光标记技术 2、免疫电镜技术 原理：抗原—抗体特异性结合、电子显微镜 免疫球蛋白 类型：IgA、IgD、IgE、IgG、IgM IgA：含量最多，占80% IgD： IgE：与抗过敏有关 IgG：唯一能通过胎盘的抗体 IgM：构成B细胞抗原受体 2、米氏常数的意义 反应速度为最大反应速度一半时的底的浓度 Km小，代表酶和底物亲和力强；Km大，代表酶和底物亲和力弱 六、抑制剂对酶作用的影响 1、不可逆抑制作用 2、可逆抑制作用 （1）竞争性抑制作用 v=，其中a=1+ Km变大，Vmax不变 （2）非竞争性抑制作用 v=，其中a=1+ Km不变大，Vmax变小 同工酶 催化相同的化学反应 酶的分子结构、理化性质、免疫功能、调控特性等有所不同 可存在于同一个体不同组织，也可同一组织、同一细胞的不同亚细胞结构 酶活力单位——在最适反应条件下（最适底物、最适pH、最适缓冲液的离子强度、25℃）下，每分钟催化一微摩尔底物转化为产物所需的酶量为一个国际酶活力单位（IU） 酶的比活力——每毫克酶蛋白所具有的酶活力单位数。 反应了酶样品纯度，比活力越高纯度越大 第三节 维生素 一、维生素的作用 作为辅酶或辅基或其组成成分 作为一个酶的辅酶，担当基团的载体 作为两个酶的辅酶，在两个酶之间作为基团的载体 二、水溶性维生素种类 三、脂溶性维生素种类 四、维生素A 又名视黄醇 胡萝卜素——维生素A源 视杆细胞中，视黄醛与视蛋白组成视紫红质，参与感光 夜盲症 五、维生素D 胆固醇衍生物 六、维生素E 又名生育酚 易被氧化，能保护其他物质不被氧化，是一种抗氧化剂 七、维生素K 又为凝血维生素 八、维生素B1 又称硫胺素，接受ATP的焦磷酸基团，形成硫胺素焦磷酸（TPP） 与糖代谢密切相关，如丙酮酸脱氢酶复合体、α—酮戊二酸脱氢酶复合体 神经炎、脚气病 九、维生素B2 又称核黄素 主要活性形式：FMN、FAD 口角炎 十、泛酸和辅酸A 辅酶A是泛酸的主要活性形式 在代谢中起传递酰基的作用 十一、维生素B6 常见有吡哆醛 是氨基酸代谢中转氨酸、脱羧酶的辅酶 十二、维生