Genistein对裸鼠卵巢癌移植瘤影响.pdf

中文摘要 Geni stei n对裸鼠卵巢癌移植瘤的影响 摘 要 目的：在妇科恶性肿瘤中死亡率最高的当属卵巢癌。因其发生发展具 期)，其五年生存率不到40％0]。肿瘤减灭术联合术后化疗成为卵巢癌治 疗的标准方案。静脉化疗复发率较高，腹腔化疗可以延长无瘤生存期并延 长总生存率，但其毒副作用较大，其应用受到限制，因此，寻找低毒有效 抗癌制剂成为当前卵巢癌治疗研究的重要课题。 大豆中天然存在的黄酮类化合物主要有3种，即大豆甙类(daidzin)、 究表明genistein具有多种生物学活性，如雌激素样作用、抗雌激素样作 用、抗氧化和调节细胞周期等，近年来因其显著的防癌抗癌效果而倍受关 注。然而genistein水溶性差，口服吸收效率较低。在绝大多数的体内外 毒副作用不可忽视，不仅影响实验效果，而且也限制药物的临床应用。羟 丙基．B．环糊精是一种无毒、刺激性小、可以供静脉注射的辅料。经羟丙 基．D．环糊精包合后的黄酮类化合物，增强了药物的生物利用度，改善了 溶解度及稳定性。近年来研究发现microRNAs是肿瘤形成过程的重要参 与者，人类多种肿瘤的发生发展与microRNAs的异常表达有关，扮演着 癌基因与抑癌基因的角色。本课题以人卵巢上皮性癌裸鼠皮下移植瘤为研 响，为Genistein在上皮性卵巢癌的I临床治疗及预防中的应用提供理论依 据。 方法： l细胞培养：人卵巢癌细胞SKOV3细胞，培养在含10％胎牛血清的 RPMI。1640培养基中，培养箱为温度为37℃，含50％C02。 中文摘要 菌培养SKOV3细胞，当细胞长至对数期时，用0．25％胰酶对细胞进行消 化，离心，配制成2．5×107个／ml单细胞悬液，在无菌条件下接种于裸鼠 背部近前肢处的皮下，每只裸鼠接种0．2ml(即5×106个细胞)单细胞悬 液。观察移植瘤生长情况，种瘤第7天选出移植瘤接种成功，并且移植瘤 直径在4～7mm的的裸鼠进行试验，将选出的裸鼠随机分成六组：对照组 只。 注射液配制成所需浓度，即刻使用。 中、高剂量分别按含genistein量50mg／kg、1 组所含羟丙基13．环糊精量进行腹腔注射，每天一次，连续3周，顺铂组 按3 物低剂量+顺铂组同两药单独给药方法。 5裸鼠重量及移植瘤体积和重量的测量：从种瘤后开始每天观察裸鼠 精神状态、饮食、大便、活动及生长等情况。治疗前测裸鼠体重，移植瘤 的最长径(a)和最短径(b)，治疗后，每周测量裸鼠体重，移植瘤的最 停药24小时终止观察，脱颈法处死裸鼠，剥取瘤组织，并称重。计算肿 瘤抑瘤率瓜(％)=(1一治疗组肿瘤平均瘤重／对照组中平均瘤重)×100％。 6免疫组织化学染色检测移植瘤组织中PTEN蛋白的表达情况。 mMRA的表 达。 8统计学方法：采用SPSSl9．0统计学软件对实验数据进行处理。等 料以析因设计和单因素方差分析进行检验，以PO．05为差异有统计学 意义。 结果： 中文摘要 1给药过程顺利，顺铂组及联合用药组裸鼠出现消瘦、：精神状态较差， 随着周龄的增加，体重有下降趋势，且与对照组相比差异均有统计学意义。 其余各组裸鼠体重均有所增长，但与对照组相比，差异无统计学意义。在 开始给药时，各组移植瘤体积无统计学差异，随时间延长各组瘤体积均逐 渐增大，给药第22天各组移植瘤平均体积均比对照组小。处死裸鼠后各 组抑瘤率分别为：联合用药组顺铂组Genistein包合物低剂量组； 虽然都能抑制肿瘤生长，但是顺铂和genistein包合物并无明显的协同作 用。 均能增加PTEN蛋白表达，与对照组相比差异有统计学意义，但是顺铂组 mRNA结果也有上述规律。 能降低miR-21的表达，与对照组相比差异均有统计学意义，但是顺铂组 顺铂对miR-21的表达无协同作用，说明顺铂不能降低miR-21的表达。 结论： 剂量增大抑制作用也增强，联合用药比单独用药组均能增加对肿瘤生长的 抑制，但统计学分析差异并无显著性，可能与样本量较小有关。 2 但顺铂对PTEN蛋白表达无明显影响，且联合用药也无明显协同作用。 3Genist