染料木素对喉癌HeP2细胞系功能影响.pdf

中文摘要 染料木素对喉癌Hep．2细胞系功能的影响 摘 要 目的：喉癌(1aryngealcarcinoma)是头颈部常见的恶性肿瘤之一，在全 cell squamous (Globocan2012)。在中国，以东北、华北和华东地区发病率最高【2J。喉癌 的病因迄今尚不完全明了，可能与吸烟、酗酒、空气污染、人类乳头瘤病 毒感染等有关。目前，主要的治疗手段为手术、放疗、化疗及生物治疗等。 虽然早期喉癌治疗效果较好，但晚期喉癌疗效和预后仍不尽人意，生存率 低，并发症多，严重影响患者的生活质量，因而寻求有效的新的诊治指标 意义重大。随着分子生物学及其技术的飞速发展，人们对喉癌发生、发展 及其分子机制的研究更加深入。关于喉癌的发生发展的相关通路的研究也 羟基异黄酮，是在大豆异黄酮复合物中含量最高、营养价值最高的～种。 染料木素是具有抗癌症作用的生物毒素单体。本课题组前期研究表明低浓 度的染料木素能引起bcl．2基因mRNA相对表达量降低，当浓度增加至 生细胞周期阻滞，主要阻滞在G2期，随药物浓度升高，S期阻滞的比率 也增高。近来研究发现，染料木素能促进多种肿瘤细胞的凋亡，抑制癌细 胞增殖和侵袭的能力，并通过介导P13K／AKT信号通路调节肿瘤细胞生长 endothelialfactor 【3J。血管内皮生长因子受体．3(vascular growthreceptor．3， 合后，可诱导内皮细胞增殖及迁移，调控血管及淋巴管内皮细胞的新生， 对胚胎发育及肿瘤的生长和转移起着重要的调节作用【4】。VEGFR-3在大 多数恶性肿瘤细胞中高表达，最近的研究表明，抑制VEGFR-3的表达通 过调节AKT[4]、ERK【5J等下游信号通路，可诱导肿瘤细胞的凋亡、抑制肿 瘤的增殖及侵袭能力。先前的研究证实，染料木素对前列腺癌细胞【6】、乳 腺癌细胞【7，81、胃腺癌细胞【9】、人结肠癌细胞【10】及人肝癌细胞【11】等有明显 抑制作用，对喉癌细胞的作用却鲜有报道，另外，此类作用的相关机制也 万方数据 中文摘要 不清楚。因此，我们将研究染料木素对喉癌细胞功能的影响，探讨染料木 素对喉癌细胞的“抗肿瘤作用”的相关机制，分析染料木素对喉癌细胞中 供理论基础，为最终提高临床喉癌的治疗效果寻找新的途径。 方法： 对照组：@Control组，用含10％胎牛血清RPMI1640培养(后简称 完全培养基)48小时，24小时换一次液； MAZ5l的完全培养基预干预细胞6 培养基培养18小时后，换含59mol／L LY294002 的特异性阻滞剂，完全培养基培养18小时后，换含259mol／L 的完全培养基预干预细胞6小时，换为完全培养基培养24小时；@Gen 为含59mol／L 养基培养1 LY294002的完全培养基预干预细 8小时后，换为含259mol／L 胞6小时，更换为含129mol／L染料木素的完全培养基作用细胞24小时。 1流式细胞术(flow 胞凋亡的情况； 2 209mol／L，409mol／L)染料木素对Hep．2细胞系增殖的影响； 3 力； 249mol／L)染料木素对VEGF家族各成员基因mRNA表达的影响； PCR)检测1 5实时荧光定量聚合酶链反应(Real—Time 29mol／L染料 ’6Western 改变。 结果：