玻璃化冷冻剖析.ppt

人卵子、胚胎玻璃化冷冻技术的研究及临床应用 汇报内容： 1、研究背景 2、研究方法 3、研究内容 4、研究结果 5、主要创新点 胚胎冷冻保存是辅助生殖领域中不可缺少的重要部分 胚胎冷冻技术的作用 提高单次取卵的累积妊娠率 减少了多胎妊娠 防止OHSS的发生 研究背景： 冷冻技术的方法 程序化冷冻 玻璃化冷冻 研究背景： 研究玻璃化冷冻对原核期、卵裂期和囊胚期人类胚胎冷冻后存活率、种植率和临床妊娠率的影响 与慢速冷冻进行比较，寻找最适合人类胚胎冷冻的方法和阶段 研究目的： 进入体外培养-胚胎移植治疗周期病人所获得的正常胚胎，分别进行玻璃化冷冻和慢速冷冻 研究方法： 第一天 第二天 第三天 第五天 第四天 冷冻胚胎移植 内膜准备 自然周期 人工周期 胚胎复苏 解冻复苏的胚胎在37℃、6% CO2 培养箱中培养2h 后优选1～2个胚胎移植。 胚胎存活: 显微镜下观察：存活卵裂球50％为胚胎存活 临床妊娠率 移植后20天B超检查，有孕囊者为临床妊娠 复苏后 冷冻前 比较玻璃化冷冻与程序化冷冻各阶段胚胎的存活率，种植率和临床妊娠率 比较同种冷冻方法不同冷冻阶段的胚胎存活率、种植率和临床妊娠率 研究内容： 从09年11月开始陆续进行开展玻璃化冷冻的临床应 用，2010年5月起胚胎保存全部实施玻璃化冷冻，到目前为止，共实施玻璃化冷冻948例，进行复苏周期877例，解冻胚胎2134个，存活率94.1%。临床妊娠率53.0%，流产率13.6%。 目前7例病人进行了卵子冷冻保存，共冷冻卵子72个。解冻卵子两例，共19个卵子，存活率89.5%，ICSI正常受精率64.7%，临床妊娠率100%。 玻璃化冷冻的临床应用 比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对胚胎发育潜能及临床结局的影响 回顾性分析2009年1月～2011年12月实施胚胎冷冻复苏的590个周期，其中程序化冷冻复苏周期133例 ，玻璃化冷冻复苏卵裂期胚胎398例，复苏囊胚期胚胎59例。 玻璃化法和程序化法冷冻人胚胎发育潜能及临床结局的比较 指标 程序化冷冻 玻璃化冷冻 周期数 133 457 解冻数 523 1148 年龄 30.5±4.2 30.2±4.1 复苏率 77.2(404/523) 94.4(1084/1148) ﹡ 完胚率 44.3(179/404) 73.7(799/1084)﹡ 平均移植个数 2.5±0.6 2.2±0.5﹡ 周期取消率 2.3(3/133) 1.3(6/457) 临床妊娠率 36.2(47/130) 50.8(229/451) ﹡ 种植率 21.1(70/331) 30.2(302/1000)﹡ 流产率 27.7(13/47) 16.6(38/229) 注：*表示两组差异显著，P0.05 玻璃化法冷冻人卵裂期胚胎和囊胚发育潜能及临床结局的比较 指标 卵裂期胚胎 囊胚期胚胎 周期数 398 59 解冻数 1007 141 年龄 30.2±4.1 30.0±4.0 复苏率 94.2(949/1007) 95.7(135/141) 周期取消率 1.5(6/398) 0(0/59) 临床妊娠率 51.8(203/392) 44.1(26/59) 种植率 30.5(273/623) 27.9(29/104) 流产率 15.8(32/203) 23.1(6/26) 注：*表示两组差异显著，P0.05 玻璃化冷冻胚胎复苏率、完胚率、临床妊娠率均高于程序化冷冻。 玻璃化冷冻法适用于人类胚胎的保存，包括卵裂期胚胎和囊胚期胚胎均可以得到同样理想的效果和临床结局。 将玻璃化冷冻技术全面应用到临床，可以提高胚胎冷冻后的存活率和临床妊娠率。 研究结果： 我们的研究表明应用玻璃化冷冻卵子可获得高的存活率，ICSI受精后获得高的卵裂率，而且胚胎发育良好，并最终获得临床妊娠成功。 本研究为人卵母细胞低温贮藏的临床应用提供了一种可靠方法。 研究结果： 建立本中心卵裂期胚胎和囊胚的玻璃化冷冻及解冻技术体系 玻璃化冷冻采用高浓度的细胞内冷冻保护剂，提高了卵母细胞冷冻存活率，ICSI受精率较高，胚胎发育良好。 主要创新点： 玻璃化冷冻卵裂期胚胎、囊胚已全面应用于临床 卵子冷冻已开展并应用于临床 已总结成文一篇，已发表 另两篇文章总结中，待发表 达到的主要技术和指标： 请提宝贵意见 省事，省时(数分钟 VS 2～3h) 经济，不用程序冷冻仪，节省液氮 高胚胎存活率 冷冻卵母细胞和囊胚 * 选择人类胚胎最适的玻璃化冷冻阶段，提高冷冻周期的种植率和临床妊娠率 通过本项目的研究，本中心有望成为较早将玻璃化冷冻全面应用的部门 * * 本中心的冷冻原则：正常2原核受精卵；发育第二天胚胎碎片50%；发育第三天胚胎卵裂球数≥6，胚胎碎片25%；发育第五、六天囊胚