紫外吸收光谱法论述.pptVIP

一、定性、定量分析 1. 定性分析 ?max：化合物特性参数，可作为定性依据； 有机化合物紫外吸收光谱：反映结构中生色团和助色团的特性，不完全反映分子特性； 计算吸收峰波长，确定共扼体系等 甲苯与乙苯：谱图基本相同； 结构确定的辅助工具； ?max ， ?max都相同，可能是一个化合物； 标准谱图库：46000种化合物紫外光谱的标准谱图 ?The sadtler standard spectra ,Ultraviolet? 2. 定量分析 依据：朗伯-比耳定律 吸光度： A= ? b c 透光度：-lgT = ? b c 灵敏度高： ?max：104～105 L· mol-1 · cm -1；（比红外大） 测量误差与吸光度读数有关： A=0.434，读数相对误差最小； a. 光吸收基本定律: Lambert-Beer定律 A=lg(I0/It)=kbc It I0 b dx I I-dI s 朗伯定律(1760) A=lg(I0/It)=k1b 比尔定律(1852) A=lg(I0/It)=k2c 吸光度 介质厚度(cm) T－透光率（透射比）（Transmittance） A = lg (I0/It) = lg(1/T) = -lgT = kbc 吸光度A、透射比T与浓度c的关系 A T c A=kbc K 吸光系数 Absorptivity a的单位: L·g-1·cm-1 当c的单位用g·L-1表示时，用a表示， A＝abc ?的单位: L·mol-1·cm-1 当c的单位用mol·L-1表示时，用?表示. ?－摩尔吸光系数 Molar Absorptivity A＝ ?bc 当c的单位用g·100mL-1表示时，用 表示， A＝ bc， 叫做比消光系数 吸光度与光程的关系 A = ?bc 光源 检测器 0.00 吸光度 检测器 b 样品 光源 0.22 吸光度 光源 检测器 0.44 吸光度 b 样品 b 样品 吸光度与浓度的关系 A = ?bc 吸光度 0.00 光源 检测器 吸光度 0.22 光源 检测器 b 吸光度 0.42 光源 检测器 b b. 朗伯-比尔定律的适用条件 单色光 应选用?max处或肩峰处测定 2. 吸光质点形式不变 离解、络合、缔合会破坏线性关系 应控制条件(酸度、浓度、介质等) 3. 稀溶液 浓度增大，分子之间作用增强 ?x104 ?(nm) 亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱 a. 6.36×10-6 mol/L b. 1.27×10-4 mol/L c. 5.97×10-4 mol/L 亚甲蓝阳离子 单体 ?max= 660 nm 二聚体 ?max= 610 nm 二聚体的生成破坏了A与c的线性关系 0 1 2 3 4 mg/ml A 。 。 。 。 * 0.8 0.6 0.4 0.2 0 溶液浓度的测定 A＝ ?bc 工作曲线法 (校准曲线) c. 朗伯-比尔定律的分析应用 吸光度的加和性与吸光度的测量 A = A1 + A2 + … +An 用参比溶液调T=100%（A=0），再测样品溶液的吸光度，即消除了吸收池对光的吸收、反射，溶剂、试剂对光的吸收等。 d.吸光光度法的灵敏度与准确度 一.灵敏度的表示方法:摩尔吸光系数 (?) A= ? b c ? =A/bc (L·mol-1·cm-1) ? 越大, 灵敏度越高: ? 104～5×104 为中等灵敏度; ? 105为高灵敏度; ? 104为低灵敏度. 二. 准确度—仪器测量误差 光度计的读数误差一般为0.2～2％(ΔT),由于T与浓度c不是线性关系，故不同浓度时的ΔT引起的误差不同。 100 80 60 40 20 0 T% ?c1 ?c2 ?c3 ?T ?T ?T-透光率读数误差 c ?c1 c1 ?c2 c2 ?c3 c3 10 8 6 4 2 0 20 40 60 80 0.7 0.4 0.2 0.1 A T% Er (36.8) 0.434 浓度测量的相对误差与T(或A)的关系 实际工作中，应控制T在10～70％, A在0.15～1.