长链非编码RNA-HOTIRM1、TP53TG1在人神经胶质瘤中的表达分析以及和糖代谢关系的初探.pdfVIP

北京协和医学院硕士研究生论文 摘 要 RNA，IncRNA)是一种内源性、长度超过 长链非编码RNA(10ngnoncoding 200个核苷酸、不编码蛋白的转录物。随着转录组测序的进步，越来越多的证 据表明长非编码RNA在细胞生物学中参与多重层次的调控功能，包括在表观 遗传水平，转录水平，以及转录后水平调控基因的表达。具体作用方式包括： 参与组蛋白修饰复合物的组装过程，促进激素信号传导通路的激活，参与 mRNA的转录后加工过程如剪接，通过同源区域与mRNA产生直接相互作用 能等。 RNA antisense lncRNA可以影响肿瘤中的抑癌信号通路。如HOX transcript 2，PRC2)招募到抑癌基因座位上，抑制抑 物2(PolycombRepressiveComplex 癌基因的表达，从而促进肿瘤增殖并抑制凋亡。另外，在DNA损伤等应激状 态下，P53可以直接诱导taurine upregulated 些lncRNA通过与蛋白相互作用，调控与细胞周期相关基因的表达。 肿瘤具有独特的能量代谢特征。肿瘤细胞的生长增殖需要充足的物质和能 量来维持，通过以下途径实现：1)增加对糖、谷氨酰胺的摄取；2)依赖糖酵 解供能，而不是氧化磷酸化，即具有瓦伯格(Warburg)效应；3)合成更多的 ATP、脂类、氨基酸和核酸；4)改变糖代谢过程中关键酶的活性等。 2012年，香港大学的研究人员利用lncRNA芯片，在两组人神经胶质瘤临 床样本(一组268例，另一组独立样本157例作为验证)中筛选差异表达的 差异高于2倍。我们希望从中寻找对胶质瘤细胞糖代谢起重要作用的lncRNA， antisense 选取HOXA反义转录物髓系异构体1(HOXA RNA， transcript 1．HOTAIRMl)和TP53靶基因1(TP531，TP53TGl)作 myeloid．specific target 为研究对象。 time 首先，我们利用Real 经胶质细胞以及胶质瘤细胞中的表达情况。结果表明：HOTAIRMl在人神经胶 质瘤细胞系中表达水平较高，TP53TGl在人正常胶质细胞中表达水平较高。 体。并进一步探究了过表达HOTAIRMl和TP53TGl对细胞存活的影响。同时， time 利用Real 北京协和医学院硕士研究生论文 和TP53TG1可以在一定程度上促进人神经胶质瘤细胞U87MG的存活。Realtime PCR结果显示：HOTAIRMl可以在mRNA水平上调葡萄糖相关蛋白78 (glucose—regulated 2，HK2)、 乳酸脱氢酶A(1actate dehydrogenase 1)、异柠檬酸脱氢酶2(isocitrate dehydrogenase1，IDH 2，IDH2)、 dehydrogenase 延胡索酸酶(fumarate hydratase，FH)、琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase