环介导的等温扩增法论述.pptVIP

环介导的等温扩增法; 聚合酶链武反应技术(PCR)自1985年问世来，以其灵敏性、特异性和快速性在医学和分子生物学等领域得到广泛的应用，由此可见核酸扩增技术的重要性。 PCR方法依据其灵敏度高、特异性好，成为目前最精准的基因诊断方法。 然而常规PCR技术存在如下缺陷： (1)需要昂贵的PCR仪； (2)多因素影响扩增效果； (3)常引起非特异性扩增； (4)扩增反应时间长，一般需要几个小时，难以在基层推广应用等诸多的缺陷，急需更新的方法来替代。 ; 近年来随着分子生物学技术的发展，新的核酸扩增技术也不断涌现。根据是否需要温度循环也可分为两类：一类是非等温扩增体系，如聚合酶链式反应(PCR)、 连接酶链式反应(LCR)等。另一类是等温扩增体系，如赖解旋酶恒温基因扩增(HDA)、核酸依赖的扩增(NASBA)、滚环扩增(RCA)、环介导的等温扩增（LAMP）等系统，核酸恒温扩增??术的出现满足了上述要求。;1、赖解旋酶恒温基因扩增技术（HDA）;2、核酸依赖的扩增（NASBA) ;3、滚环DNA扩增;（2）指数RCA 指数RCA与线性RCA相似，它采用了第二种引物。该引物序列与环状DNA序列完全一致。在RCA循环中，此引物与第一次线性RCA产物结合并在聚合酶的作用 下延伸，其产物又作为 第一种探针的模板，这 样一来产物呈指数递增。 指数 RCA也可用于非