21细胞的显微观察技术总汇.ppt

第21讲;认识显微镜;;基本内容;1、解剖显微镜 简介： 在观察物体时能产生正立的三维空间影像。立体感强，成像清晰和宽阔，又具有长工作距离，并是适用范围非常广泛的常规显微镜。操作方便、直观、检定效率高。;;解剖镜下的蜱虫;2、光学显微镜 光学显微镜一般由载物台、聚光照明系统、物镜，目镜和调焦机构组成。 光学显微镜是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，以供人们提取微细结构信息的光学仪器。;;3、荧光显微镜 ： 荧光显微镜是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。;;正处于有丝分裂中期的动物上皮细胞。绿色的是微丝，红色为肌动蛋白，蓝色的染色体正处于赤道板。;4、相差显微镜 利用物体不同结构成分之间的折射率和厚度的差别，把通过物体不同部分的光程差转变为振幅（光强度）的差别，经过带有环状光阑的聚光镜和带有相位片的相差物镜实现观测的显微镜。主要用于观察活细胞或不染色的组织切片，有时也可用于观察缺少反差的染色样品。;;5、暗视野显微镜 在聚光镜中央有挡光片，使照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至4-200nm的微粒子，分辨率可比普通显微镜高50倍。;基本原理： 利用丁达尔效应。当一束光线透过黑暗的房间,从垂直于入射光的方向可以观察到空气里出现的一条光亮的灰尘“通路”,这种现象即丁达尔效应。 暗视野显微镜在普通的光学显微镜上换装暗视野聚光镜后,由于该聚光器内部抛物面结构的遮挡,照射在待检物体表面的光线不能直接进入物镜和目镜,仅散射光能通过,因而视野是黑暗的。 暗视野显微镜由于不将???明光射入直接观察系统，无物体时，视野暗黑，不可能观察到任何物体；当有物体时，以物体衍射回的光与散射光等在暗的背景中明亮可见。在暗视野观察物体，照明光大部分被折回，由于物体(标本)所在的位置结构，厚度不同，光的散射性，折光等都有很大的变化。;;6、激光共聚焦显微镜;;;植物细胞中过氧化氢含量(绿色荧光深度代表浓度)随盐胁迫时间进程(图片间时间间隔为5分钟)的变化;;;;;;;;;;7、扫描电子显微镜;氧化锌;乳腺癌细胞;前列腺癌细胞;肾结石晶体;毛毛虫头部;黄胡蜂头部;跳蚤头部;黄蜂头部;苍蝇;花粉;;;;;;基本内容;三、总结 四、作业： 简述显微镜的分类及各种特点