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实验二 微量凯氏定氮法
实验二 微量凯氏定氮法;中和程度用滴定法来判断,分回滴法和直接法两种。
(1)回滴法:用过量的标准酸吸收氨,其剩余的酸可用标准NaOH滴定,由盐酸量减去滴定所耗NaOH的量即为被吸收的氨之量。此法采用甲基红做指示剂。
(2)直接法:用硼酸作为氨的吸收溶液,结果使溶液中[H+]降低,混合指示剂(PH4.3-5.4),黑紫色变为绿色。再用标准酸来滴定,使硼酸恢复到原来的氢离子浓度为止,指示剂出来淡紫色为终点,此时所耗的盐酸量即为氨的量。;二、试剂
样液:1g卵清蛋白溶于0.9%NaCl液,并稀释至100ml。如有不溶物,离心取上清液备用。
浓硫酸(A.R.)。
硫酸钾:硫酸铜=3:1(W/W)混匀研成粉末。
30%氢氧化钠溶液:30gNaOH溶于蒸馏水,释至100ml。
2%硼酸溶液:2g硼酸溶于蒸馏水,释至100ml。
混合试剂:0.1%甲基红酒精溶液和0.1%甲烯蓝酒精溶液按4:1比例(V/V)混合。本指??剂在PH5.2时为紫红色,PH4.5时为暗蓝(或灰色)色,PH5.6时为绿色,变色点PI为5.4。
0.01mol/L标准盐酸溶液,用恒沸盐酸准确稀释。;三、操作方法;消化;蒸馏; 四、思考题
1.总氮测定时,消化至关重要,样品消化时注意事项有哪些?
2.样品的蛋白质含量为多少?
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