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2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体;植物体细胞杂交的意义:;一、动物细胞融合;(一)动物细胞融合的概念;细胞A;用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程;灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面;两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的;为什么灭活的病毒能作为诱导剂?;(三)动物细胞融合的应用;主要用于制备单克隆抗体;二、单克隆抗体;(一)获得抗体的传统方法;人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体,必须克隆单一的B淋巴细胞,形成细胞群。;2、怎样才能获得单克隆抗体?;如何大量生产单克隆抗体?; ;整个制备过程为何要经过两次筛选?;如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养?;在多孔培养板上,在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下,培养得到的细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的,所以产生的抗体必然是化学性质单一的,特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义,只不过克隆的不是B淋巴细胞,而是杂交瘤细胞。 ;单克隆抗体的概念:
由单个杂交瘤细胞进行无性繁殖,也就是通过克隆,形成细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 ; 注射抗原;为什么不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间的融合? ;我们以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道,体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上,但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,如果仅取一个脾细胞(含B淋巴细胞)和一个瘤细胞杂交,我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否正是我们所需要的;若用大量的脾细胞和瘤细胞进行融合,就可以从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
;(三)单克隆抗体的应用; 资料:
目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病,用单克隆抗体作为诊断手段,是一个必然趋势。另外,用单克隆抗体做体内诊断,借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意,目前,主要用于肿???追踪及心肌梗塞的诊断。;思考与探究;2.制备单克隆抗体时,为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞?;1.在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正
确的是( )
A.结果是相同的
B.杂种细胞的形成过程基本相同
C.操作过程中酶的作用相同
D.诱导融合的手段相同
;2. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞
诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,
在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( )
① 淋巴细胞
② 小鼠骨髓瘤细胞
③ B淋巴细胞自身融合细胞
④ 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞
⑤ 杂交瘤细胞
A. ②④ B.①③⑤
C. ①②③④ D.②③
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