第一章 色谱导论.pptVIP

;§1.6 色谱的定性和定量分析; 最早的色谱分析法是俄罗斯植物学家Michail- Tswett在1906年，将碳酸钙装填在玻璃管(也称为色谱柱，Column)内，石油醚洗脱，用于分离植物叶子中的叶绿素，植物叶子的提取液在通过柱子后，在柱床上出现了不同颜色的色带，因此他将这种方法命名为色谱法(Chromatography)。这就是最早使用的柱色谱法。其中碳酸钙为固定相，石油醚为流动相。;色谱法分离的基本原理：是基于组分通过互不相溶的两相而达到分离的， ，其中一相是不动的，称为固定相，另一相是携带混合物流过此固定相的流体，称为流动相。当流动相中所含混合物经过此固定相时，就会与固定相发生作用。由于各组分在性质和结构上的差异，与固定相发生作用的大小强弱也有差异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。流出的物质用相应的检测器进行检测。这种利用物质在两相间分配原理而使混合物中各组分分离，进而同时进行分析的技术称为色谱分析法，或色谱法。; 外色谱法即柱色谱法(Column Chromatography),即是说，在气相色谱、高效液相色谱或液体色谱中，所有的组分在相同的流动相推动下通过柱床，由于组分与固定相之间特殊的作用力，各个组分在柱后显示了不同的保留时间，并可用外部连接的检测器检测。;2.根据固定相和流动相的不同，柱色谱的分类见下表：  表1-1 柱色谱法的分类 流 动 相 固定相 色谱法 气 体 固体 GSC(气-固色谱) 液体 GLC(气-液色谱) 液 体 固体 LSC(液-固色谱) 液体 LLC(液-液色谱） 超临界流体 SFC(超临界流体色谱) ;4. 根据分离过程的机制的不同，色谱法又分为： 吸附色谱法 分配色谱法 离子交换色谱法 排阻色谱法 ;一.色谱图的展开 在柱色谱分离方法中最常用的是洗脱技术(Elution Technique)，在该法中，首先将样品溶解在流动相中，然后将其加入柱顶，最后用流动相洗脱，当流动相连续地加入柱顶，组分就在柱内新的流动相和固定相之间分配，与固定相的作用力强的组分比作用力弱的组分保留的时间长，经过一段时间的洗脱，它们即可被分离，并可在柱后以不同的时间顺序依次流出并分别被检测。图1-1是样品A，B，C三组分的色谱分离检测示意图。;;在柱色谱中，根据检测信号与洗脱时间或洗脱体积的函数关系得到的图称为色谱图(Chromatogram)。柱中物质的谱带移动存在着两种趋向。峰间距的增加，和峰的扩展造成峰变宽。;图1-2 色谱图中的相关参数;1. 基线 当色谱柱没有组分进入检测器时，在实验操作条件下，反映检测器系统噪声随时间变化的线称为基线。稳定的基线是一条直线。如图中的ot所示的线。 ; 死时间tM 指不与固定相作用（吸附，溶解）的物质（如空气，甲烷）从进样开始到柱后出现浓度最大值时所需要的时间。;保留体积VR 指从进样开始到柱后被测组分出现浓度最大值时所通过的载气体积，即 VR = tR · F0;相对保留值r2,1或? 指某组分2的调整保留值与另一组分1的调整保留值之比：;图1-3 色谱流出曲线图;利用流出的曲线（色谱图）可以解决以下问题： （1）根据色谱的位置（保留值）可以进行定性检定 （2）根据色谱的面积或峰高可以进行定量测定 （3）根据色谱峰的位置及其宽度，可以对色谱柱分 离情况进行评价。;§ 1.3 色谱分析理论基础; 在填充柱内填充的固定相有两类 即气-固色谱分析中的固定相和气液色谱中的固定相。; 在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度比称为分配系数K。; 在实际工作中常应用另一表征色谱分配过程的参数—分配比。分配比亦称容量因子或容量比，是指在一定温度、压力下，在两相间达到分配平衡时，组分在两相间的质量比，用k来表示：; （1）分配系数是组分在两相间分配达到平衡时的浓度之比，分配比则是组分在两相间的分配总量之比。;显然Rs亦可用质量分数来表示：;§1.4 色谱理论;一. 塔板理论;塔板号