以钾离子通道为靶点抗癫痫药物对在体海马区电活动影响.pdfVIP

摘 要 摘 要 背景 癫痫是一种常见多发的以大脑神经元异常放电引发突然短暂反复发作为特 征的神经系统疾病，严重威胁人类生命与健康。目前临床上癫痫的治疗主要依 靠药物疗法，但现有的药物无法适用所有患者且毒副作用大。 瑞替加滨是唯一一个被 FDA 批准上市的用于成人部分发作辅助治疗的 KCNQ 钾通道激动剂药物。KCNQ 钾通道在神经兴奋性调节中起着基础而关键 的作用，以瑞替加滨为代表的 KCNQ 激动剂因而被寄予厚望，其抗癫痫作用机 制被广泛研究，但是目前已有的研究多为体外电生理记录，而对与癫痫相关脑 区（如海马）神经元电活动的影响不清楚。 目的 建立稳定的自由活动动物脑电信号采集系统，通过对自由活动正常大鼠海 马神经元电活动的记录分析，研究以瑞替加滨为代表的 KCNQ 钾通道激动剂对 大鼠海马神经元放电的影响，探索该类化合物治疗癫痫的神经电生理作用机制， 为发展新型抗癫痫药物提供理论指导。 方法 本实验采用健康雄性 Sprague-Dawley (SD) 大鼠（250-350g）， 行常规开颅 手术，在海马 CA1 区手术植入单电极 2*4 阵列，动物术后常规护理，自由饮食， 恢复 7 天。电生理记录时，动物处于自由活动状态，其脑部电极可稳定记录神 经元放电，且这种放电可持续存在 1-2 周。运用多通道在体记录系统，将前置放 大器接于电极板，电信号传输进入采集器，储存于 Recorder 16 系统，数据进行 离线分析。 运用多通道在体记录系统观察瑞替加滨对自由活动大鼠海马神经元的影 响，实验时先稳定记录电信号 10 min，腹腔注射给予动物 15 mg/kg 瑞替加滨， 再连续稳定记录和采集电信号 360 min。此外，观察瑞替加滨能否反转钾通道抑 制剂 4-氨基吡啶（4-AP）或 XE991 导致的自由活动大鼠海马神经元的兴奋性升 高，电信号采集方法同前，在腹腔注射给予 4-AP（5 mg/kg）电信号稳定记录 20 min 后或 XE991（10 mg/kg）电信号稳定记录 120 min 后，腹腔注射给予瑞替加 II 万方数据 摘 要 滨 15 mg/kg，稳定记录 360 min。所有电信号均存储于电脑中，采用 Offline Sorter 进行离线分析。 结果 在我们实验室成功建立了基于动物实验的脑电信号采集系统，实现了对自 由活动动物脑电活动的记录。运用这个系统，我们将海马神经元进行分类并考 察瑞替加滨对海马神经元放电的影响。我们发现大鼠腹腔注射 15 mg/kg 瑞替加 滨能显著抑制海马锥体神经元与中间神经元的自发放电。此外，同剂量瑞替加 滨能翻转钾通道抑制剂 4-AP (5 mg/kg, 0.2ml/100g) 或 XE991 (10 mg/kg, 0.2ml/100g) 导致的海马神经元兴奋性升高。 结论 我们的工作首次采用自由活动大鼠在体记录方式考察 KCNQ 钾通道激动剂 瑞替加滨对大鼠神经元核团放电的影响，发现该药物对海马锥体神经元和中间 神经元的兴奋性均