《生物制药》酶类药物1概述.ppt

第四章 酶类药物;第一节 药用酶类的概述;关于酶，你已经知道了哪些知识？还想知道哪些知识？;酶的分类;“绿色健康，“酶”力无限 医药、洗涤剂、纺织、淀粉制糖、发酵、酒精、食品（包括果蔬汁、啤酒酿造、谷物食品、蛋白水解、和功能食品以及食用油脂）、饲料、皮革、造纸和化工等工业领域 ;淀粉酶类与淀粉糖业;果汁生产与果胶酶;酶蛋白成为药物应具备的条件;酶类药物在疾病治疗方面的应用;;栓溶酶类与心血管疾病;凝血酶;健美生消化酶—帮助肠胃蠕动 【产品规格】90片／瓶 【食用方法】成人每日3片，随主餐服用 【成分(每片含)】 1)消化蛋白质：木瓜蛋白酶50毫克、菠萝蛋白酶30毫克； 2)消化脂肪：脂肪酶30毫克； 3)消化碳水化合物/淀粉：淀粉酶50毫克； 4)消化乳制品：乳糖酶30毫克； 5)消化纤维：纤维素酶15毫克。 另含：能抑制过多胃酸的葡萄糖酸钙，能缓解反胃薄荷叶和茴香 【适用人群】 ·消化不良者 ·肠胃疾病患者 ·大病初愈者;第二节 酶类药物的制造过程;2. 注意不同生长发育情况及营养状况 3. 原料来源丰富 4. 从简化提纯步骤着手 5. 如用动物组织作原料，应在此动物宰杀后立即取材。;二、微生物酶制剂高产菌株的选育;三、微生物酶制剂生产的发酵技术;（二）培养方法;3.影响酶产生的一些因素 除培养基，发酵工艺参数对产酶的影响也十分明显。 (1) 温度 (2) pH (3) 通气 (4) 搅拌;(5)泡沫 发酵过程中，由于发酵液受到强烈的通气搅拌，培养基中某些成分的变化及代谢中产生气体，会形成较多的泡沫，而且气泡不易消失，是由于培养基中蛋白质分子排在气泡表面形成一层吸附膜，聚集成泡沫层之故。 消泡剂：天然油类，醇类，脂肪酸类，胺类，酰胺类，磷酸酯类，金属皂类，聚硅氧烷等。;(6) 添加诱导剂和抑制剂 诱导酶 抑制剂（表面活性剂）;四、酶类药物的提取和纯化;;2. 微生物材料的预处理 胞外酶:除去菌体后再直接从发酵液中吸附提取酶。 胞内酶:将菌体细胞破壁，制成无细胞的悬浮液后再行提取。;1.干燥法:干燥后菌体产生自溶 （1）空气干燥:适用于热稳定的酶 （2）真空干燥:适于细菌 （3）冷冻干燥:适用于较敏感的酶 2.机械法 （1）研磨法 （2）组织匀浆法 （3）超声波法 （4）高压匀浆法 3.酶法处理;(二) 酶的提取 1.水溶液法 常用稀盐溶液或缓冲液提取。经过预处理的原料，包括组织糜，匀浆，细胞颗粒以及丙酮粉等，都可以用水溶液抽提。 许多酶再蒸馏水中不溶解，而在低盐浓度下易溶解，所以提取时加入少量盐可提高酶的溶解度。;2.有机溶剂法 某些结合酶如微粒体和线粒体膜的酶，由于和脂质牢固结合，用水很难提取，为此必须除去结合的脂质，且不能使酶变性，最常用的有机溶剂是丁醇。 丁醇具有以下特点：（1）亲脂性强，特别是亲磷脂的能力；（2)兼具亲水性，在0℃在水中的溶解度为10.5%；（3）在脂与水分子间能起类似去垢剂的桥梁作用。 3.表面活性剂法;(三) 酶制剂的工业提取法;酶的分离提纯三个基本环节： 第一抽提，即把酶从材料转入溶剂中制成酶溶液； 第二纯化，即把杂质从酶溶液中除掉或从酶溶液中把酶分离出来； 第三制剂，即将酶制成各种剂型。 在酶的分离纯化过程中．每步都须做三件事： 第一，测定酶活力(IU/m1)； 第二，测定蛋白质含量(mg/m1)； 第三，测量体积(m1)。;酶是生物活性物质，操作条件要温和，一般在0～5℃间进行。 初分：用分离蛋白质的方法，如盐析、等电点沉淀、有机溶剂分级、选择性热变性等方法可从酶粗提液中初步分离酶。 细分：再采用吸附层析、离子交换层析、凝胶过滤、亲和层析、疏水层析及高效液相色谱法等层析技术或各种制备电泳技术进一步纯化酶，以得到纯的酶制品 结晶:酶的结晶过程进行得很慢，需要数天或数星期。;凡用于蛋白质的纯化手段均适用于酶的纯化 酶的提纯常包括两方面的工作: (1) 浓缩：把酶制剂从很大体积浓缩到比较小的体积， (2) 去杂蛋白：把酶制剂中大量的杂质蛋白和其他大分子物质分离出去。;一般原则： 防止强酸、强碱, 要求加入的化学试剂不使酶变性； 在低温下操作，全部操作在低温0～4℃； 在分离提纯过程中，避免剧烈搅拌； 在提纯溶剂中加一些保护剂，如少量EDTA、少量β-巯基乙醇； 在不破坏所需酶的条件下，可使用各种“激烈”的手段。;(一) 杂质的除去;(3) 选择性变性法 利用蛋白质稳定性的不同，除去杂蛋白。 (4) 核酸沉淀剂法 在微生物制备酶时，常含有较多核酸，可用核酸酶降解，离心分离，用核酸沉淀剂如三甲基十六烷基溴