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诱骗受体 3（ DcR3 ）在胰腺癌中对 T 淋巴细胞功能影响的实验研究 中文摘要 诱骗受体3（DcR3 ）在胰腺癌中对 T淋巴细胞功能影响的实验研究 中文摘要 第一部分 诱骗受体3（DcR3 ）在胰腺癌中的表达及临床意义 目的 研究诱骗受体3（DcR3 ）在胰腺癌中的表达，并探讨其临床意义。 方法 （1）用免疫组织化学法（IHC ）和酶联免疫吸附试验（ELISA ）分别检测 40 例胰腺癌患者组织标本和血清中DcR3 蛋白的表达，分析其与临床病理因素之间的 相关性。（2）用流式细胞仪（FCM ）检测上述40 例胰腺癌患者外周血中CD4 +、CD8 +T 细胞的表达，探讨DcR3 对胰腺癌患者机体免疫功能的影响。 结果 （1）DcR3 在胰腺癌组织中阳性率为 62.5% ，在相应非癌胰腺组织中阳性 率为 12.5% 。DcR3 在胰腺癌组织中的阳性率明显高于非癌胰腺组织，两者的差异有 统计学意义（χ2=21.33 ，P0.001 ），而且 DcR3 的表达与肿瘤分期及淋巴结转移密切 相关，差异有统计学意义(P0.05) 。（2）胰腺癌患者血清中 DcR3 的表达水平明显升 高，与胰腺良性肿瘤组和正常健康组相比，差异均有统计学意义（P0.01 ）。（3）胰 腺癌患者外周血中 CD4 +/CD8 +比值与 DcR3 表达水平呈负相关关系（Spearman ， r=-0.6512 ，P0.0001 ）。 结论 DcR3 蛋白在胰腺癌中的高表达与肿瘤分期及淋巴结转移呈正相关。血清 中 DcR3 的表达与胰腺癌患者外周血中 CD4 +/CD8 +呈负相关，是影响机体免疫功能的 因素之一。 第二部分 在胰腺癌细胞中靶向沉默DcR3 对T淋巴细胞功能的影响 目的 观察在胰腺癌 Panc-1 细胞中靶向沉默 DcR3 的表达对 T 淋巴细胞功能 的影响。 I 中文摘要 诱骗受体 3（ DcR3 ）在胰腺癌中对 T 淋巴细胞功能影响的实验研究 方法 构建针对 DcR3 基因的小干扰 RNA 慢病毒包装体系转染人胰腺癌 Panc-1 细胞，转染后与淋巴细胞混合培养，采用流式细胞术检测 T 细胞活化，T 细胞亚群的 变化以及 Th1 细胞、Th2 细胞的偏移，ELISA 检测 IFN-γ 和 IL-4 水平。流式细胞术 通过 CD3 -/Annexin V-FITC/PI 检测混合培养细胞中肿瘤细胞的凋亡率，并用利用 CFDA-SE 检测分析混合培养细胞中 T 淋巴细胞增殖率。 结果 （1）转染 DcR3-siRNA48h 后的 Panc-1 细胞中 DcR3 蛋白表达下降。（2） 转染细胞与 T 淋巴细胞混合培养后 CD3 +、CD4 +T 细胞增多（P0.05 ），而 CD8 +T 细 胞无明显变化，而且 Th1 细胞增多，Th2 细胞细胞减少（P0.05 ），细胞上清液中代 表 Th1 型细胞因子的 IFN-γ 浓度升高（P0.01