人斯钙素1的重组表达和其对卵巢癌细胞生物学行为影响的研究.pdfVIP

摘要人斯钙素?闹刈楸泶锛捌涠月殉舶┫赴??镅?行为影响的研究研究生刘培培在女性生殖系统恶性肿瘤中，卵巢癌的发病率位居第二位，但死亡率却居于首位。虽然随着肿瘤细胞减灭术的不断改善，以及铂类为基础联合紫杉醇化疗的广泛应用，使?％的初治患者获得临床缓解。但是，随之发生的化疗耐药、发生发展的机制，寻找有效的逆转耐药、抑制转移的治疗靶点，在卵巢癌的治疗中显得愈发重要而迫切。人类斯钙素??????????琒??表达于肾脏、卵巢、前列腺、甲状腺、结肠、骨骼和脾脏等多种组织中，以自分泌和旁分泌的方式参与调节多种生理和病理活动。目前有越来越多的证据显示??和多种肿瘤发生密切相关。有报小细胞肺癌、乳腺癌和白血病等疾病。??过度表达预示着肿瘤预后较差。本课题组的前期研究首次证明??与卵巢癌发生发展相关，度表达使卵巢癌细胞对卡铂的化疗抵抗增加。肿瘤的增殖、转移和化疗抵抗会导致肿瘤的高死亡率，因此，进一步探讨??与肿瘤的关系，尤其是卵巢癌的导师张菊新教授史惠蓉教授郑州大学第一附属医院妇产科河南郑州???背景与目的早期复发令多年来卵巢癌的疗效并无显著改善。因此，探讨卵巢癌耐药机制和道显示??可作为有效的诊断和微转移标志来检测胃癌、食管鳞状细胞癌、非??的过关系有着重要的意义。前期研究还显示，??的抗凋亡作用可以被抗??的单抗中和，因此，??有可能用于卵巢癌临床诊断的标志物，并作为卵巢癌治疗的药物靶点。 瞚???多肽获得目的蛋白。??锄??验证目的蛋白免疫活性。动物实验检测目的蛋抗癌药物产生交叉耐药的一种现象，而这些抗癌药物的结构和作用机制可能完全不同的。引起多药耐药的机制包括：药物外排的增加，药物在体内的活化减少改变药物的作用靶点，损伤靶点的修复力增强，细胞周期停滞和细胞凋亡的抑??甜?阛?????出细胞，而这种排出泵的作用是借助于??┠埽?佣?够?埔┡懦鱿赴???低细胞内药物浓度，导致肿瘤细胞耐药。该家族参与肿瘤多药耐药的主要成员尿液中磷酸盐含量的影响来检测??蛋白的生物学活性。第二部分主要是??对卵巢癌细胞生物学行为影响的研究。通过??对细胞增殖、对化疗耐引起耐药的相关信号通路打下基础，为制备??的单克隆抗体药物及探讨??蛋白作为卵巢癌诊断标志等研究打下了基础。为卵巢癌的临床诊断和治疗?⒔?呕?铣傻乃垢扑????的???慰寺〉奖泶镌靥錺?．???上，重组质粒转入大肠杆菌中诱导表达，在变性条件下纯化包涵体，经透析复多药耐药???????????琈??侵赣梢恢忠┪镉辗ⅲ??倍云渌?嘀?制等。其中??T说鞍壮?易???????员介导的药物外排在??衅鹆酥匾W饔茫?彩悄壳肮?谕庋芯康娜鹊阒?弧?当化疗药物进入细胞后，药物与??T说鞍壮?易宄稍苯岷希?芙?┪铩氨?为???嘁┠鸵┗??、??多药耐药相关蛋白???冲俘?侔┠鸵┑?白?妊羌易濉?本研究共分两个部分：第一部分是??基因表达载体的构建，以及原核表达载体在大肠杆菌中的表达、包涵体的纯化和复性。通过检测??蛋白对大鼠药及耐药相关基因的表达情况对其功能进行研究，试图探讨??对卵巢癌细胞中耐药基因相对表达水平变化，从而找出其引起耐药的相关基因，也为找出??提供可能。方法性得到可溶的斯钙素?诤系鞍祝??C该盖泻笥酶咔缀湍?胱邮髦??蕉嘤?白的生物学活性。?⒔ɑ竦玫挠猩?镅Щ钚缘腟??鞍祝?尤氲降捅泶颯??穆殉舶┫?摘要? 的表达水平却无明显变化?．?????????⒒妨柞０?尺????统ご盒录?氏???的化疗耐药。的相对表达情况的影响。?．?臣蒲?砑??型臣蒲Х治觥＜屏孔柿辖峁?云骄?怠?标准差?土?表示，两组以上数据采用单因素方差分析或双因素方差分析。以构建了?????．??表达载体，获得??目的蛋白。动物实验表明注入?????螅琒??蟠笫竽蛞褐辛姿嵫魏?????±????和注入??罅姿嵫魏???．?±????相比，差异有由生长曲线可看出??可以促进卵巢癌细胞系???蚈???的??可以增加卵巢癌细胞系???远辔魉??????、顺铂明显增加??????琈??虰?冲的表达水平降低??．???鳯?无明显变化??．??欢?杂贏??细胞系，?牡谋泶锼?矫飨栽龈???晒?菇?藀?????甋??泶镌靥澹?⒒竦肧??康牡鞍住?胞株???????中，用细胞计数法研究??对卵巢癌细胞株增殖、??法研究??对化疗药的细胞毒性作用的影响和用?甈?研究各耐药相关基因?⒉捎肧??????2钜煊型臣蒲б庖濉?结果结论统计学意义??．??Ｑ橹ち薙??哂写俳?笫笈判瓜低扯粤姿嵫?重吸收的生物学活性。增殖。???????幕?颇鸵┖蚈???对多西他赛??．??、顺铂加入??后????赴?抵蠸???蚓?鱿稚?逤????，在????赴?抵校??冲?蚆??的表达水平在加入??之后??．??琈????冲和??的表达水平降低?甈?．???鳰????竦昧司哂猩