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专题2 微生物的利用;考纲要求;一、微生物的实验室培养
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对_________的不同需求,配制出供其
_________的营养基质。
(2)营养构成:一般都含有_______________和无机盐。此外还
需要满足微生物生长对___、氧气以及_____________的要求。
(3)种类:按照物理性质可分为_____培养基和固体培养基。;2.无菌技术
(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止_________的方法。
(2)关键:防止_________的入侵。
(3)不同对象的无菌操作方法(连线):;3.大肠杆菌的纯化培养
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:
计算 _____ 溶化 _____ _______;(2)纯化大肠杆菌的方法:
①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而
来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤:_____。
③常用的微生物接种方法有两种:
a.平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面_________
_______,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b.稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的_________,然后将
___________的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培
养。;(3)菌种的保存方法:
①对于频繁使用的菌种,可以采用_________的方法。
②对于需要长期保存的菌种,可以采用_________的方法。;二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.分离原理
土壤中细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成_____,这种
物质在把尿素分解成无机物的过程中起到_____作用。
2.统计菌落数目
统计样品中的活菌一般用_____________法。
3.实验流程
土壤取样→___________→微生物的培养与观察→细菌的_____。;三、分解纤维素的微生物的分离
1.纤维素酶
(1)组成:纤维素酶是一种_______,一般认为它至少包括三种组
分,即______________________。
(2)作用:
纤维素 _________ _______;2.纤维素分解菌的筛选
(1)原理: 纤维素分解菌
(2)筛选方法:_______染色法,即通过是否产生_______来筛选
纤维素分解菌。
(3)培养基:以_______为唯一碳源的选择培养基。;(4)实验流程:
土壤取样:富含_______的环境
↓
选择培养:用___________培养,以增加纤维素分解菌的浓度
↓
_________:制备系列稀释液
↓
涂布平板:将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
↓
挑选产生_______的菌落;1.(2012北京T5C)将转基因植物的叶片接种到无菌培养基上,应
该进行严格的无菌操作。( )
【分析】植物组织培养技术成功的关键就是保证无菌条件,如
果接种时不进行严格的无菌操作,可能导致实验失败。
2.(2012北京T5D)将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分
离分解尿素的细菌,是否无菌操作影响较小。( )
【分析】土壤浸出液中含有多种杂菌,所以利用选择培养基筛
选土壤浸出液中特定微生物时,不需要进行严格的无菌操作。;3.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。
( )
【分析】培养基是根据培养微生物的需求配制的,微生物都需
要水、碳源、氮源和无机盐四种营养成分。
4.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的惟一氮源。
( )
【分析】分解尿素的细菌能合成脲酶,脲酶能催化分解尿素,所
以筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的惟一氮源。;5.土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是必不可
少的。( )
【分析】土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是
否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。
6.在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染色剂,若出
现透明圈,则说明筛选到分解纤维素的细菌。( )
【分析】刚果红染色剂能与纤维素结合发生颜色反应,形成红
色复合物。分解纤维素的细菌产生纤维素酶分解纤维素,在分
解纤维素的细菌的周围出现透明圈。;7.统计样品中的活菌一般使用平板划线法。( )
【分析】使用平板划线法能分离微生物,但不能对微生物进行
计数。;考点一 培养基配制
1.培养基的成分;营养
物质
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