蝉花菌种退化对其代谢影响.pdf

量较高。人工栽培的孢梗束中胆碱、环丝氨酸、米曲霉麦角甾醇等物质含量较高，而 甘露醇，17一羟基亚油酸，8．羟基亚油酸等物质的含量较低。固体平板培养物和人工 栽培的孢梗束中N6- 2．羟乙基 腺苷含量均较高。这说明液体发酵和固体发酵培养方 式均适用于产甘露醇的培养，而海藻糖更适宜采用固体发酵培养方式来获得；液体发 酵培养不适宜作为生产拮抗抑制剂N6一 2一羟乙基 腺苷的培养方法。 用ISSR分子标记技术对蝉花继代培养菌株及角变菌株的遗传多样性进行了分 析，结果表明蝉花实验菌株继代培养15代菌株聚类成3组，前5代为一组，7～9代 为一组，后5代为一组，这说明随着传代次数的增加，蝉花的基因组DNA也随着继 代培养发生变异。变异表现出数量遗传的特性，即随着传代次数的增加而不断积累， 到一定代数会表现出质的变化。然而，在逆向的变异过程中，也会出现正向的回复变 异。因此，蝉花菌种变异的情况是十分复杂的。该研究结果与代谢组学分析结果形成 一定程度的一致性：蝉花的15代菌株基于遗传相似系数也是这样聚为3类，G1、G3、 结果的聚类一致，说明有可能利用简单的ISSR分析来判定复杂的蝉花代谢产物的变 化。 对蝉花继代培养菌株的清除自由基活性研究结果进一步表明，蝉花供试菌株Gl 代清除自由基能力比较强；各代菌株清除自由基能力表现出一定的阶段性，G7和G9 代是其中的转折阶段。这与表型差异研究、代谢组学分析以及ISSR分析结果基本一 致，确证蝉花继代培养7～9代为变异和退化发生的重要转折阶段。三种不同培养方式 获得的蝉花培养物在清除自由基活性方面表现出差异性。固体平板培养菌丝体清除 DPPH活性较弱，液体培养菌丝体清除·OH自由基活性较弱，而人工栽培获得的孢梗 束清除两种自由基的活性均较高。 综合以上研究结果，在蝉花的继代培养中，由于人工培养条件与其自然生长条件 有很大差别，导致对蝉花产生胁迫作用，这种胁迫影响到相关基因的表达，因而伴随 各种形态学和生物学特性的明显变异，蝉花的代谢产物也会发生深刻的变异；简单的 ISSR指纹图谱能在一定程度上反映代谢组学的变化：不同的培养方式会产生不同的 活性物质；继代培养7～9代为变异和退化发生的重要转折阶段，在蝉花人工培养中需 特别注意。在传代初期，其退化是渐变的，人们无法通过常规观察和显微观察发现， 但从代谢组或ISSR图谱可以看出变化，因此该方法可提前预知蝉花退化情况。 关键词：蝉花，继代培养，退化，表型，代谢组学，ISSR 万方数据 Abstract Isaria namedas cicadaorcicada a cicadae IC，hereafters ，also flower,is vegetable valuable studiesconfirmedthenatural and cicada·parasiticfungus．Numerous synnemata cultured and a ofactive myceliasynnematacontainingvariety substances，hassignificant and withnaturalICand biologicalactivitypharmacological effects．Compared Cordyceps ofICismoresecurethanwild from sinensis，cultured the products products，and ofwildlife and perspective resource environmental preservation ofIChas other filamentous products greatapplicationprospects．However,like fungus， and rateofIC whenaisolateis colony growth morphology change successively subculturedonartificial the to and bioactive media，while abilityproducesyrmymatatarget substances affectsthe and ofIC this decreased，which outputqualityproducts．In study,the of inICwas mechanismsofthe phenomenondegeneration concerned．Degeneration onICwillbediscussedfromvariation ofand impact process betweenthe relatio