【金版学案】2014-2015学年高中生物专题五1DNA的粗提取与鉴定新人教版选修1论述.ppt

专题5　DNA和蛋白质技术　　　　　　　　　　　　　 　　　　　课题1　DNA的粗提取与鉴定; 情景导入; 情景导入;DNA的提取是现代生物技术进行中药鉴别的最关键步骤。总DNA的有效提取要求材料中的DNA尽可能少地降解。但用于生药真实性鉴别的药材在干燥、加工、贮藏等过程中均造成了DNA不同程度的降解，一般DNA的含量也比较低。药材中次生代谢产物含量较高，会干扰提取。另外也可能有微生物引起的外源DNA的污染。DNA的质量将直接关系到实验的成败。不同的研究目的对DNA的纯度和量的要求不尽相同。 ;请思考： 1．DNA是怎样提取的？ 2．DNA是怎样进行鉴定的？ ; 情景导入;1．DNA的粗提取 (1)基本思路：利用DNA与______、________和______等在物理和化学性质方面的______，提取DNA，去除其他成分。 (2)方法和原理： ①DNA和________等其他成分在不同浓度的______溶液中溶解度不同，利用这一特点选择适当的________就能使DNA充分溶解，而使______沉淀，或者相反，以达到分离目的。 ;②DNA不溶于______，但是某些______则可溶于其中。 ③______能水解蛋白质，但是对______没有影响。 ④大多数蛋白质不能忍受________的高温而发生变性，而DNA在________以上才会变性。 ⑤________能瓦解细胞膜，但对DNA无影响。 ;;二、实验设计 ;;;;; 情景导入;一、DNA粗提取的原理 1．DNA溶解度 ;蛋白质;总结;2.DNA与蛋白质对蛋白酶、高温、洗涤剂的耐受性的区别;　　　　 盐析和高温对DNA活性的影响不同 ①盐析过程DNA的空间结构不变，没有变性，只是溶解度降低。 ②高温使DNA和蛋白质变性时破坏的键不同。DNA变性时，氢键被破坏，而蛋白质变性时往往破坏二硫键，因此降温时DNA能复性，而蛋白质不能。 ;例1　DNA在NaCl溶液中的溶解度有两重性，随NaCl溶液浓度的变化而变化，则下图所示能反映DNA的溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是(　　); 情景导入;解析：DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低。 答案：C ;变式 训练;变式 训练;二、DNA的粗提取和鉴定的实验过程的分析 ;; 情景导入; 情景导入; 情景导入;2．实验过程中的几点注意事项 (1)实验中两次加入蒸馏水的目的不同： ①第一次的目的是使鸡血细胞吸水涨??，加水后必须充分搅拌，不应少于5 min，使血细胞充分吸水涨破。 ②第二次的目的是为了稀释NaCl溶液，使DNA逐渐析出。 (2)实验中三次加NaCl溶液的目的： ①第一次加入NaCl溶液后必须充分搅拌，加速染色质中DNA与蛋白质分离，使DNA充分游离并溶解在NaCl溶液中。 ;②第二次加入NaCl溶液的目的是使DNA溶解。 ③第三次(即DNA鉴定环节)中加NaCl溶液的目的是溶解DNA。 (3)实验中六次搅拌的目的： ;;①哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核，无DNA分子，不能作为提取DNA的实验材料②若选取肝脏细胞或植物细胞，由于肝组织含较多蛋白质纤维，植物组织有胞间连丝和细胞壁，则必须充分研磨。 ③过滤时不能用滤纸代替纱布，否则会因DNA被吸附到滤纸上，而导致DNA大量损失。;④相关试剂的作用辨析： a．柠檬酸钠：作为抗凝剂，防止血液凝固。 b．洗涤剂：能够瓦解细胞膜，释放内含物DNA。 c．食盐：可以加速核蛋白解体，游离出DNA分子。;例2　(双选)下表是关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述，正确的是(　　);;解析：在DNA粗提取与鉴定实验中，柠檬酸钠可以防止血液凝固；鸡血中加入蒸馏水可以使细胞膜和核膜破裂；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度最低，有利于DNA析出；DNA不溶于酒精，可以获得较纯的DNA；DNA遇二苯胺(水浴加热)产生蓝色反应。 答案：AC;2．下列关于DNA的粗提取和鉴定的有关说法，正确的是(　　) A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的增大而增大 B．溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL二苯胺试剂即变蓝色;C．DNA粗提取和鉴定时，选材最好用鸡血而不用猪血 D．提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，食盐有利于DNA从细胞中释放出来 ;解析：从DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线可知，NaCl溶液在低于0.14 mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐下降，0.14 mol/L时溶解度最低，当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA的溶解度逐渐增加。A项只注重一段范围内的变化，不够全面。二苯胺试剂使用时需要水浴加热才能出现实验现象。猪的