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目 录
1.中文摘要 ……………………………………………………………03
2.英文摘要 ……………………………………………………………05
3.主要英文缩略图表………………………………………………… 07
4.引言 …………………………………………………………………08
5.实验材料 ……………………………………………………………10
6.实验方法 ……………………………………………………………15
7.实验结果 ……………………………………………………………25
8.讨论 …………………………………………………………………36
9.结论 …………………………………………………………………40
10.参考文献……………………………………………………………41
11.致谢…………………………………………………………………44
12.综述…………………………………………………………………45
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万方数据
Cks1、Cks2 对人类肝癌细胞系 HepG2 增殖与凋亡的影响
中文摘要
目的：
研究 CKs1、CKs2 对肝癌细胞 HepG2 增殖、凋亡及细胞周期调控的影响，探
究肝细胞癌致病机理，为肝细胞癌临床治疗提供新的线索。
方法：
1、设计并合成分别针对 Cks1、Cks2 基因的 SiRNA 序列，以脂质体介导，转染肝
癌细胞株 HepG2，干扰目的基因的表达；
2、构建分别针对 Cks1、Cks2 基因的 pcDNA3.1/Hygro-IRES2-EGFP 质粒载体，使
用脂质体介导，转染肝癌细胞株 HepG2，增强目的基因的表达，建立过表达稳定
转染细胞系；
3、转染后收集细胞，应用 real-time PCR 分别检测 Cks1、Cks2 mRNA 表达水平。
应用 western blot 分别检测 Cks1、Cks2 蛋白质表达情况。
4、运用 CCK-8 和细胞计数方法检测干扰和增强后细胞的增殖情况；
5、应用 Annexin-V/PI 双染细胞，以顺铂诱导细胞凋亡，流式细胞术分析干扰和
增强后细胞凋亡情况。
6、使用 PI 染色，流式细胞术分析干扰和增强后细胞周期变化。
7、选取若干个与细胞生存、增殖密切相关的蛋白质——Akt、GSK-3β、Bcl-2，
在目的基因干扰后进行 western blot 检测，观察蛋白表达的变化。
结果：
1、R
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