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04.体外分析技术
;定义;; 体外分析技术是结合了放射性核素的高灵敏度和特异性结合反应的高特异性的一种超微量分析技术,具有灵敏度高、特异性强、精密度好、应用面广、方法简便等优点。;发展;近年来的主要优势包括多种技术的互相渗透,自动化程度的提高等。例如将酶免疫分析技术与荧光技术或化学发光技术结合,建立的荧光酶免疫分析及化学发光酶免疫分析,可极大地提高灵敏度,增大检测范围。
在时间分辨荧光免疫分析( TRFIA)等分析法中应用新技术实现多个待测物同时检测。;结合反应动力学规律
遵守可逆反应的质量作用定律:
k1, v1
[R]+[L] [RL]
k2, v2;放射性测量技术
酶定量技术
化学发光定量技术
荧光定量技术;特异性结合反应:
抗原--抗体的免疫结合反应;
配基--受体的结合反应;
底物--催化酶之间的酶促反应;
结合体:
抗原--抗体;
激素--激素结合球蛋白;
受体--配体;;体外分析技术;放射免疫分析 radioimmunoassay, RIA;一、RIA的基本原理;基本原理;Ag;(二)剂量反应曲线:标准曲线;标准曲线的绘制方法;;B%;未知样品的测量;Ag;B%;优缺点比较;1、放射免疫分析技术;1、放射免疫分析技术;2、酶标记免疫分析技术;2、酶标记免疫分析技术;3、时间分辨荧光免疫分析技术;3、时间分辨荧光免疫分析技术;4、化学发光免疫分析技术;4、化学发光免疫分析技术;4、化学发光免疫分析技术;;辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图 ;碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图 ;4、化学发光免疫分析技术;电化学发光免疫分析示意图;4、化学发光免疫分析技术;几种标记/检测技术灵敏度的比较;几种标记/检测技术线性范围的比较;几种标记/检测试剂的有效期比较;;临床应用;(一)肿瘤标志物及其临床意义;理想的肿瘤标志物;肿瘤的发生发展;肿瘤的发展及诊断期;肿瘤标志物在全球的应用情况;肿瘤标志物的分类(化学特性);肿瘤与肿瘤标记物;不同的肿瘤标记物可能出现在相同的粘蛋白上
在肿瘤细胞株中CA199,CA50和CA242共同表达于
MUC-1和诞腺蛋白中。(Baeckstrom et al, 1992);肿瘤标志物基本上不能对肿瘤定位。
极少数肿瘤标志物如PSA,PAP,甲状腺球蛋白具器官特异性,但不具肿瘤特异性。;通常不能进行确诊。
因为肿瘤标志物无足够的灵敏度,不能
排除假阴性结果。
本周蛋白(多发性骨髓瘤)、AFP(肝
癌)、?-HCG(绒毛膜癌)和降钙素
(甲状腺C-细胞癌)等有助确诊。;;临床常用肿瘤标志物的组合;临床常用肿瘤标志物的组合;;;;;;;人附睾上皮分泌蛋白4(HE4);;; 前列腺特异性抗原(PSA);游离PSA在正常男性含量小于1?g/L
前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎和前列腺损伤都会导致血清PSA升高
血清 PSA在男性其他正常组织中和患其他癌肿时血清PSA都不会升高。
;肿瘤标记物的临床意义; (二)性激素相关指标;激素分类;生殖内分泌激素的检测;性激素常用检测菜单;(三)骨质疏松相关指标;*;*;*;*;*;*;*;*;*;*;(四)感染相关指标;;目前科室主要检测仪器;目前科室主要检测仪器;目前科室主要检测仪器;*;*
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