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基因工程 第三讲： DNA纯化后的利用;讲课提纲;为了得到重组DNA分子，载体分子和将要被克隆的DNA都必须在特定的位点被切开，并以可控方式连接在一起。
另外，还可以对DNA进行：
切短和延长，
转录成RNA或复制成新的DNA分子，
添加或去除一些化学基团而修饰。
研究生化性质、基因结构和控制基因表达的。;几乎所有的DNA操作都要使用纯净的酶。
酶：
在细胞内参加各种基本反应；
从细胞提取纯化后，能够在人工条件下，催化其天然反应，或类似的反应。
这些酶促反应大多数无法用化学方法实现。因此纯化的酶对于基因工程是非常关键的，其制备、性质研究和市场买卖已经形成了一个重要的产业。;;DNA操作酶的范围;;;3.1.1 核酸酶;;;3.1.2 连接酶;3.1.3 聚合酶;第一种：DNA聚合酶I;;Klenow片段;Taq DNA聚合酶;逆转录酶;3.1.4 DNA修饰酶（modifying enzymes）;;3.1.5 拓扑异构酶(topoisomerases);3.2 切割DNA的酶—限制性内切酶;;;3.2.1 限制性内切酶的发现和其功能;;3.2.2 限制性内切酶Ⅱ;;3.2.3 平末端和黏末端;;;3.2.4 DNA分子中识别序列的出现频率;;;;3.2.5 实验室条件下的限制性酶切;;;;;3.2.6 分析限制内切酶的酶切结果;通过凝胶电泳分离生物大分子;;;使凝胶中的DNA分子可视化;;对放射性标记的DNA进行放射性自显影;;;3.2.7 DNA分子大小的估计;;3.2.8 通过作图标出DNA分子的限制性酶位点;;;;;;3.3 连接-将DNA分子连接到一起;3.3.1 DNA连接酶的作用模式;;3.3.2 黏末端可增加连接的效率;;3.3.3 将黏末端加在平末端分子上;第一种-DNA接头(1inkers);;;第二种-寡核苷酸接头(adaptors);;;;;第三种-通过附加同聚物反应产生黏末端;;;;
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