沈萍 微生物学 第十章微生物与基因工程.docx

微生物与基因工程 genetic engineering Genetic engineering 基因工程：实现基因克隆所采取方法及相关的工作统称为重组DNA技术或重组DNA工艺学或基因工程 一 重组DNA技术相关概念 Clone :来自同一始祖细胞的相同副本或拷贝的集合；获取同一拷贝的过程称为克隆化(cloning)也就是无性繁殖。 DNA clone:应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质与载体DNA结合成具有自我复制能力的DNA分子（复制子replicon），继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子，即DNA克隆，又称为重组DNA recombinant DNA。 replicon 复制子：在体外将各种来源的遗传物质与载体DNA结合成具有自我复制能力的DNA分子。 DNA chimeras嵌合DNA：克隆某一基因或DNA片段过程中，将外源DNA插入载体分子所形成的复制子是杂合分子，称为嵌合DNA。 二 基因工程基本过程 1基因的分离或合成：基因文库或cDNA文库分离；化学合成；PCR；定点诱变改造基因 2外源基因与载体DNA的体外重组：利用重组DNA技术将外源基因插入质粒、病毒或染色体DNA构建成的载体中含有自主复制起点的“重组DNA分子” 3重组DNA导入宿主细胞通过转化、转染或感染等方式将重组DNA导入微生物或动